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feiye2214

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】十万火急,IPTG诱导是怎么回事,给我说个大概 已有5人参与

RT:IPTG诱导大致原理
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feiye2214

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+3):good! 2010-10-22 20:25:40
引用回帖:
Originally posted by 临风7071 at 2010-10-22 19:33:54:

可以的,pGEX-4T-1的载体上有T7 启动子,当转导大肠杆菌中一定要是DE3的,就可以表达的。DE3的大肠杆菌的基因组中整合了T7 RNA聚合酶基因,可以高效表达。如果连到PET载体上,那就需要IPTG诱导了

遇到高手了,我就把我做的跟你说说,帮我看看哈!

我将EGFP基因(来自pEGFP-1,酶切位点是Not I/EcoR I)插到上图的pGEX-4T-1的Not I/EcoR I中!这样重组的质粒应该能表达EGFP 吧,要在DE3大肠杆菌中表达?不是很清楚,我是直接转到DH5a感受态中的,要换菌还是怎么诱导?才能让EGFP在大肠杆菌中表达哈!
这是我的pEGFP-1图



[ Last edited by feiye2214 on 2010-10-22 at 20:15 ]
6楼2010-10-22 20:13:51
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silicare

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
  网上到处都是,baidu or google
2楼2010-10-22 14:29:00
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看懂了乳糖操纵子就知道IPTG诱导的原理了
3楼2010-10-22 14:56:45
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feiye2214

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2010-10-22 14:56:45:
看懂了乳糖操纵子就知道IPTG诱导的原理了

如果我的目的基因的载体没有乳糖操纵子,就不能表达了吗?
还是有其他的诱导方式?pGEX-4T-1装载一个目的基因
4楼2010-10-22 17:10:58
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