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feiye2214

木虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】十万火急，IPTG诱导是怎么回事，给我说个大概已有5人参与

RT：IPTG诱导大致原理

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1楼 2010-10-22 14:08:05

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feiye2214

木虫 (正式写手)

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amisking(金币+3):good！ 2010-10-22 20:25:40

引用回帖:

Originally posted by 临风7071 at 2010-10-22 19:33:54:

可以的，pGEX-4T-1的载体上有T7 启动子，当转导大肠杆菌中一定要是DE3的，就可以表达的。DE3的大肠杆菌的基因组中整合了T7 RNA聚合酶基因，可以高效表达。如果连到PET载体上，那就需要IPTG诱导了

遇到高手了，我就把我做的跟你说说，帮我看看哈！

我将EGFP基因（来自pEGFP-1，酶切位点是Not I/EcoR I）插到上图的pGEX-4T-1的Not I/EcoR I中！这样重组的质粒应该能表达EGFP 吧，要在DE3大肠杆菌中表达？不是很清楚，我是直接转到DH5a感受态中的，要换菌还是怎么诱导？才能让EGFP在大肠杆菌中表达哈！
这是我的pEGFP-1图