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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么凝胶层析过滤得到的图谱中峰特别宽
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woaipan

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】为什么凝胶层析过滤得到的图谱中峰特别宽 已有6人参与

小弟最近在做凝胶过滤层析，柱填料分别是G－50和G-75的，进口分装的，但是几次过柱子得到的图谱峰都特别宽，不知道什么原因？
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1楼 2010-10-20 20:59:21
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woaipan

铜虫 (初入文坛)
有高手能解答吗，不甚感激啊
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2楼2010-10-21 11:23:26
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烟大考研

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-10-21 11:34:59
首先要排除样品的问题，样品是否足够纯，不纯可能会出现这种现象。
再考虑下填料有没有问题，是不是适合该种样品。
排除样品问题，测定下塔板数，峰太宽了一般是塔板数比较低
再就是环境的影响比如温度，洗脱条件等
以上都没有问题建议重装下柱子，装的尽量紧密点。
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
3楼2010-10-21 11:32:06
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gdxinlan

禁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽
4楼2010-10-21 13:16:31
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-21 14:44:25
我得到的峰也很宽，这种东西除非是分子量相差很大，不然分不开的。预装的姑且如此，就更别说自己装的了。楼主用蓝色葡聚糖来过一下，看看上样多少毫升，收集液有多少就知道效能了。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2010-10-21 14:12:34
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lfxfj2010

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
，两个问题1、上样量过大
            2、流速过小
鉴定完毕，欢迎批评
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6楼2010-10-21 14:21:45
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lfxfj2010

金虫 (初入文坛)
还有补充，个人愚见，如果能够将样品分开，不用去测什么柱效，浪费资源
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7楼2010-10-21 14:23:08
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woaipan

铜虫 (初入文坛)
多谢各位大虾的帮忙回帖，我自己估计一可能是上样量的问题，样品可能太浓可能也有关系，还想问下如果踏板数测算下来过低怎么办啊
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8楼2010-10-21 15:11:00
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豆波波

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 烟大考研 at 2010-10-21 11:32:06
首先要排除样品的问题，样品是否足够纯，不纯可能会出现这种现象。
再考虑下填料有没有问题，是不是适合该种样品。
排除样品问题，测定下塔板数，峰太宽了一般是塔板数比较低
再就是环境的影响比如温度，洗脱条件 ...

塔板数要达到多少柱子才算合格？
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9楼2019-03-28 20:19:28
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