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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教一个his-tag蛋白质纯化问题
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merryjuna

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教一个his-tag蛋白质纯化问题 已有5人参与

我想知道洗脱过程中咪唑最高浓度可达到多少？如果方便帮忙给出示例文献（刊名，年卷期就可以）或参考书，我做蛋白质修饰的过程中用到咪唑，希望通过这个证明高浓度咪唑下蛋白质不会变性
网络上查到有1M的，但不知道哪里找参考文献？或者是否有更高？
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1楼 2010-10-19 16:13:23
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zheng20089829

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这样啊，不好意思，没看清楚。我用500 的纯化测酶的活性基本没有影响，1M就不清楚了，不行实践一下，呵呵
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4楼2010-10-19 16:52:27
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zheng20089829

木虫 (小有名气)
★ ★
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-19 18:54:56
1M太高了吧，我有蛋白两个组氨酸尾巴500mM就可以了，为什么用那么高浓度啊？
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2楼2010-10-19 16:15:58
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merryjuna

银虫 (小有名气)
先谢谢你，我不是这么高浓度咪唑纯化蛋白，而是修饰中用到这么高的咪唑，简单来说有一步化学反应需要这么高的咪唑浓度
引用回帖:
Originally posted by zheng20089829 at 2010-10-19 16:15:58:
1M太高了吧，我有蛋白两个组氨酸尾巴500mM就可以了，为什么用那么高浓度啊？

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3楼2010-10-19 16:22:17
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-19 18:55:14
1M完全可以，不过会把杂蛋白洗下来啊。建议做一下咪唑梯度洗脱。
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5楼2010-10-19 17:00:02
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