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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么PCR引物不能反复冻融？后果会是怎样
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新虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】为什么PCR引物不能反复冻融？后果会是怎样 已有17人参与

如题。有人的意见是引物没那么脆弱，到底情况是什么样子？
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1楼 2010-10-17 17:50:47
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
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肯定要反复冻融的，而且有可能达到上百次
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2楼2010-10-17 18:37:04
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lyq06043106

木虫 (正式写手)
★
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问题不大吧，话说我用引物一般一管要用20多次，没出现过问题呀，楼主淡定
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3楼2010-10-17 18:37:52
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-17 19:03:50
以我做实验的经验，只要正规公司合成的引物，没有那么脆弱的，很多常用的引物我直接都在四度保存，没事的。当然，也有一些很讲究的人，引物稀释以后，会分装到几个离心管，这是个很好的习惯，应该提倡的。
引物只要是合成的没有问题，出问题的几率很小，楼主可以放心
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4楼2010-10-17 18:43:45
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新虫 (正式写手)
听完大家的意见，淡定了
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5楼2010-10-17 20:31:34
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-17 20:52:19
为什么要那么不规范的操作呢。。

引物  工作液4度保存。  高浓度的保存液-20度。

你要说反复冻融没问题。 那这个没问题的标准是什么？15%碎片化？ 17%碎片化？ 为什么要冒这个险。

想不明白。
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6楼2010-10-17 20:42:52
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)
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新手
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7楼2010-10-17 21:38:19
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怎么都行

银虫 (小有名气)
★
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不是说不能冻融，引物是寡核苷酸链，反复冻融的次数多了肯定会降解的嘛
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8楼2010-10-17 22:01:24
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tingspdf

至尊木虫 (著名写手)
★
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原则上取一点现用，但以我的经验没什么影响
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9楼2010-10-17 23:26:01
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)
★ ★
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-18 08:39:16
我是这么理解的 反复冻融不会出问题 关键问题在高浓度液如果取的时候不小心污染 那可不就会造成“反复冻融降解”的假象
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风中摇曳的颤枝，何处是归根？
10楼2010-10-18 00:44:58
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