24小时热门版块排行榜    

查看: 3623  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

coolairen

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于16srRNA菌种鉴定问题 已有3人参与

第一次发帖,好紧张

    自己筛了一株细菌,对其进行了诱变,拿到北京一个民营的菌种鉴定中心进行16srRNA的鉴定,结果出来后,去NCBI进行比对,发现诱变前后两株菌不是一个种,本来是想比较诱变前后基因序列的变化,现在显示竟然不是一株菌,心里那个凉啊。
    我对分子生物学不是很懂,在这里请教一下高手:对细菌进行诱变后,会使细菌的种属发生改变吗?我还怀疑是不是鉴定中心的人给搞错了,他们说比对的时候减去前面的50个碱基和后面150个碱基,我不明白是什么意思?是不是前面50个碱基里有引物片段,不准确?

   请高手指点。多谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coolairen

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by girlfisher at 2010-10-18 21:33:19:
直接PCR测序的话,你的目标16s基因中两头各50bp左右序列是无法测准的,所以你的引物常常找不到,只有把PCR产物克隆到载体上,用载体的引物和载体上大约100多bp的片断作为不准确测序的炮灰,才能获得准确的带有你引 ...

请问,有没有这种可能:在诱变过程中,细菌的16srRNA,即保守序列会不会发生很大的变化?
10楼2010-10-20 21:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

天龙n部

金虫 (小有名气)


coolairen(金币+1):谢谢参与
silicare:pfu 2010-10-16 15:06:28
coolairen(金币+1):谢谢,多明白了一些。16s不是我自己做的,北京的这家公司做的。PCR具体用的什么东西我不知道,也不是很懂,这个我要问问这家公司 2010-10-16 18:10:46
16s是你自己做的吗(我指基因操作)?前面和后面切点式为了切掉通用引物片段。一般诱变种属不会变。你PCR用的是puf酶吗?测序的一半都用高保真的酶的。还有你想比较诱变后基因的变化,也不是比较16s啊16s还是很保守序列啊。
2楼2010-10-16 14:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stliimoon

金虫 (小有名气)

★ ★
coolairen(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-16 14:50:34
实在是不明白你做过诱变后,去做16sRNA鉴定是做什么用的,16sRNA是用来鉴定菌种的,你要是不知道你的菌是什么种属,才去做菌种鉴定,你这都知道是什么菌了,去做什么啊,先不管你做的成功不成功,你这方法有点问题吧。
其次,你诱变后是用来做什么的,你先看诱变后对你要的东西有没有变,要是变了再找寻相关的基因序列和蛋白表达等的变化。
你原来的菌种已经已知种属了吗?要是已知的或是鉴定过,那么有可能是聚合酶的问题或提基因组时养菌染菌了。要是没有明确鉴定过,请确认一下通用引物是不是有什么问题。
3楼2010-10-16 14:42:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主


coolairen(金币+1):谢谢参与
眼前的证据表明,你的菌可能被污染了
4楼2010-10-16 15:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 3/150 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:29 by eObJPa4gWmp6
[找工作] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 7/350 2026-09-06 11:40 by eObJPa4gWmp6
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 7/350 2026-09-06 11:20 by eObJPa4gWmp6
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +10 瞬息宇宙 2026-09-01 19/950 2026-09-06 11:15 by jiangxuan2004
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 8/400 2026-09-06 11:09 by eObJPa4gWmp6
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 8/400 2026-09-06 11:00 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 7/350 2026-09-06 11:00 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 4/200 2026-09-06 07:20 by E1iiBLMU2XnD
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 7ZYIEW2YWn72 2026-09-04 9/450 2026-09-06 06:00 by E1iiBLMU2XnD
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 CRJ0Aq2FtVH0 2026-09-03 15/750 2026-09-06 05:48 by E1iiBLMU2XnD
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 5/250 2026-09-06 02:39 by E1iiBLMU2XnD
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 5/250 2026-09-06 02:19 by E1iiBLMU2XnD
[基金申请] 面上没中,邀请各位路过的虫友分析一下分数 +12 jackleilei 2026-09-03 13/650 2026-09-05 18:10 by fireguard
[文学芳草园] 初秋的晨风 +4 阿美_Lml888 2026-09-04 6/300 2026-09-05 13:51 by 阿美_Lml888
[博后之家] 广西大学-广州大学招聘博士后 欢迎广大优秀人才!!! +4 SCSIOyxguo 2026-09-03 7/350 2026-09-05 10:39 by Honglianlian
[硕博家园] Ei源刊怎么投 +4 Fengshun9711 2026-09-04 4/200 2026-09-04 19:30 by 研途知予
[硕博家园] 哈尔滨工业大学韩晓军教授课题组招收2027年硕士推免生及博士研究生 +3 灯灯灯灯DDDD 2026-09-03 3/150 2026-09-03 21:22 by 科研皮皮猪
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
信息提示
请填处理意见