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bayleaf1987

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于农杆菌菌液PCR已有6人参与

大虾们,实验中遇到了一个神奇的问题,我把连好的载体转化农杆菌,长斑后做了菌落PCR,没有问题,然后挑斑在10ML的管子里摇菌做菌液PCR也没有问题,可是然后我从管子里吸取了一部分菌液到50ML的大管子里摇菌准备做侵染,为了保险起见我用大管子的菌液又做了一次菌液PCR,然后神奇的问题出现了,居然没有条带了,保证任何东西都没有加错。。请问这是什么缘故啊???谢谢各位~
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bayleaf1987

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 临风7071 at 2010-10-15 16:47:14:

请问你有农杆菌转基因的方法(侵染植株的)吗?我最近也在做,侵染不上啊,郁闷啊!!

你做的是什么植物啊?这个好像和植物本身很有关系的~
3楼2010-10-15 17:01:32
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临风7071

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by bayleaf1987 at 2010-10-15 16:40:02:
大虾们,实验中遇到了一个神奇的问题,我把连好的载体转化农杆菌,长斑后做了菌落PCR,没有问题,然后挑斑在10ML的管子里摇菌做菌液PCR也没有问题,可是然后我从管子里吸取了一部分菌液到50ML的大管子里摇菌准备做 ...

请问你有农杆菌转基因的方法(侵染植株的)吗?我最近也在做,侵染不上啊,郁闷啊!!
2楼2010-10-15 16:47:14
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ben1147

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 临风7071 at 2010-10-15 16:47:14:

请问你有农杆菌转基因的方法(侵染植株的)吗?我最近也在做,侵染不上啊,郁闷啊!!

侵染不上是什么意思?转化率低?长得不好?还是什么?

这显然跟取的外植体有关
4楼2010-10-15 18:26:23
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ben1147

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by bayleaf1987 at 2010-10-15 16:40:02:
大虾们,实验中遇到了一个神奇的问题,我把连好的载体转化农杆菌,长斑后做了菌落PCR,没有问题,然后挑斑在10ML的管子里摇菌做菌液PCR也没有问题,可是然后我从管子里吸取了一部分菌液到50ML的大管子里摇菌准备做 ...

重复一次,确定现象。
有抗生素吗?
5楼2010-10-15 18:27:01
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