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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【专题】------------------感受态、转化专题------------------
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):没办法啊，国货不行。。。 2010-10-11 23:53:57
我们实验室使用Takara感受态制备试剂盒，操作很简单，制备的感受态比买的感受态效价还好。当然之前活化的步骤还是一样严格要求。
PS：以上内容并非广告。
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Thank-you，so-blue.
11楼2010-10-11 19:58:37
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)
★
silicare(金币+1):这个是必须的 2010-10-12 08:34:59
一要冷，二动作要轻。
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12楼2010-10-11 21:52:15
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怎么都行

银虫 (小有名气)
★
silicare(金币+1):有失败经历吗？ 2010-10-12 08:35:35
我都是用的成品感受态细胞，操作过程中只需要注意一个字——轻，热击冰浴之前的步骤要小心，切忌剧烈晃动。
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13楼2010-10-11 21:56:41
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silicare

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引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-10-11 19:58:37:
我们实验室使用Takara感受态制备试剂盒，操作很简单，制备的感受态比买的感受态效价还好。当然之前活化的步骤还是一样严格要求。
PS：以上内容并非广告。

哪一种？
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14楼2010-10-12 11:53:37
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-10-12 11:53:37:


哪一种？

http://www.takara.com.cn/?action ... =135&subclass=1
这种。
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Thank-you，so-blue.
15楼2010-10-12 13:57:49
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+3):谢谢参与 2010-10-12 14:53:23
化学法做感受态，最简单的莫过于0.1M CaCl2了，当然有兴趣的话，还有更复杂的配方，能够提供比单纯CaCl2高1-2个数量级的转化效率。比如下面这两种
10mM KAc，100mM KCl，45mM MnCl2， 10mM CaCl2，100mM RbCl
或者
10mM MES(pH 6.3), 45mM MnCl2, 10mM CaCl2, 100mM RbCl, 3mM Co(NH3)6Cl3

不过我都没有试过，因为实在不想为了做个感受态单独买个什么氯化铷，
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16楼2010-10-12 14:20:08
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stao4312

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):哪里没看懂？ 2010-10-12 14:55:38
看了半天没有看懂
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17楼2010-10-12 14:26:23
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silicare

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引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-12 14:20:08:
化学法做感受态，最简单的莫过于0.1M CaCl2了，当然有兴趣的话，还有更复杂的配方，能够提供比单纯CaCl2高1-2个数量级的转化效率。比如下面这两种
10mM KAc，100mM KCl，45mM MnCl2， 10mM CaCl2，100mM RbCl
或 ...

很多时候KCl可以替代RbCl, 不知道效果怎么样，过两天试试
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18楼2010-10-12 14:54:22
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-10-12 14:54:22:


很多时候KCl可以替代RbCl, 不知道效果怎么样，过两天试试

确实是，这个方法的来源里也说RbCl可以用KCl代替。
据说做得好能到10^9，比较玄乎了
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19楼2010-10-12 15:37:02
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silicare

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引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-12 15:37:02:

确实是，这个方法的来源里也说RbCl可以用KCl代替。
据说做得好能到10^9，比较玄乎了

感受态能到8次方就很 不错了
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20楼2010-10-13 12:38:51
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