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luizing

银虫 (正式写手)

应助: 3 (幼儿园)
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虫号: 855707
注册: 2009-09-24
性别: GG
专业: 临床细胞学和血液学检验

[求助] 大家帮我看看cDNA图片对吗？

图片：

1，2道是我PCR的结果，条带还是好淡
第3道是cDNA，我觉得看得怎么像RNA啊
4,5道是RNA，今天提的，可能是酒精没晾干，所以加样后漂浮起来了
最后一道是D2000Marker

逆转录的试剂盒是TAKARA的，随机引物。
请问cDNA的条带是这样的吗

做了好久的PCR，条带总是好淡，不知是什么原因？

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知识改变命运

1楼2010-10-04 16:41:35

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

倒霉熊

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
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帖子: 17
在线: 23.6小时
虫号: 1007789
注册: 2010-04-28
性别: MM
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

cDNA条带就是这样弥散状的，里面有2~3条明显的条带，就是RNA的，是RNA做反转录时量多了，还有很多没有转成cDNA~~~ 不过这样的浓度已经足够做下一步的PCR了，毕竟是2的n次方扩增哈

但你的1,2 PCR结果都有两条带？是引物设计得不是很特异吧？重新设计下引物会好一些。实在不成就切胶回收吧，就是麻烦些~~~