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【求助/交流】G418筛选稳定转染
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chen860729
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专业: 细胞增殖、生长与分化
[交流]
【求助/交流】G418筛选稳定转染
已有5人参与
转染pEGFP-N1载体,然后用G418筛选,筛选很长时间,细胞没有死亡,但是没有表达绿色荧光。pEGFP-N1载体能整合到真核细胞的染色体上吗?
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1楼
2010-10-04 14:40:21
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10楼
2015-05-16 15:04:52
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lwiaanngg
铁杆木虫
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专业: 应用高分子化学与物理
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
不一定的,看你的同源的效果了
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2楼
2010-10-04 16:16:30
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-10-06 08:35:16
在筛选剂条件下细胞有逃逸的可能,先设一个筛选浓度的梯度,看看对照组细胞在什么浓度下完全不生长,就用那个浓度筛选
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3楼
2010-10-04 17:58:53
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铁虫
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注册: 2010-09-26
性别: GG
专业: 预防兽医学 病毒学
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-10-06 08:35:26
我也做稳定筛选方面的实验,也遇到了您所说的问题,已经持续快一年了,始终不行。建议你不要完全信任真核表达载体,最好还是要尝试一下病毒载体。
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4楼
2010-10-04 22:54:13
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