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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】哪位同仁做过噬菌体肽库或者抗体库淘筛的，请一定要进来呀~~~~
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luckydong1

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】哪位同仁做过噬菌体肽库或者抗体库淘筛的，请一定要进来呀~~~~已有9人参与

我在做噬菌体肽库的淘筛，是筛一种蛋白，富集的时候包板是以包被液为空白对照，以高浓度的BSA做封闭液，用不同的洗脱方法做了多次，问题在于以包被液为空白对照获得的重组菌总是比试验组的多，不知道有没有同仁在富集的时候也做过阴性对照做比较的，这阴性对照的重组菌较多，是不是说明吸附包被原的阳性克隆就比较少，甚至没有呢？这淘筛做了很久，望有经验的虫友赐教了
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1楼2010-10-02 09:16:44
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岁寒之梦

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，我以前做过噬菌体展示这方面的，不过biopanning过程我们是采用的一步有机相分离方法，是一种液相筛选，避免了固相亲和筛选的一些缺点。具体你可以上网查查。

[ Last edited by 岁寒之梦 on 2013-3-12 at 13:19 ]
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13楼2013-03-12 13:17:35
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也很想知道，关注下。
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52187644
2楼2010-10-02 09:56:09
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我本兽医

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你好，我做过噬菌体筛选实验，关于你的问题我挺感兴趣的，不过对于某些名词还没有理解上去（比如富集是指的什么），可能是不同生物公司的说明书不一样吧。能把实验步骤稍微写的清楚一些么？
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3楼2010-10-04 23:11:33
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luckydong1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 我本兽医 at 2010-10-04 23:11:33:
你好，我做过噬菌体筛选实验，关于你的问题我挺感兴趣的，不过对于某些名词还没有理解上去（比如富集是指的什么），可能是不同生物公司的说明书不一样吧。能把实验步骤稍微写的清楚一些么？

你好，噬菌体展示就是一个筛选的手段，我们是在噬菌体文库中筛选得到和靶分子特异结合的噬菌体，这个筛选的同时也是个富集的过程，就是经过几轮筛选，使得和靶分子结合的噬菌体数量越来越多，最终能挑选出亲和力强的克隆。请问能加我QQ吗？我绝不是坏人，我只是想找个朋友交流实验。我的Q171293155
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4楼2010-10-06 15:54:54
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