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amilie030312

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by luckydong1 at 2010-10-02 09:12:17:



谢谢指教。我的片段是很亮的,而且没有杂带,回收之后的样本也稀释了十倍才做模板的,但是P出来的是弥散带,这么说来,应该是乙醇残留??再次谢谢指教

如果是乙醇残留应该是对PCR有抑制,不会条带很亮的。
弥散多半是温度不对,温度低了会出弥散,不知道你的是不是这个情况,我原来是模板稀释一百倍的
11楼2010-10-09 10:36:19
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
或者胶回收的带是杂带也说不定,总之多做几次
一直向前!
12楼2010-10-09 10:42:18
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guanjinyan87

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
先测下OD值,确认下回收到了
13楼2012-12-04 20:42:22
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sarah-miao

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
其实主要貌似不是乙醇残留的影响,而是PCR产物其实不适合作为模板进行扩增,最好还是从载体载体上扩,而且,你如果是PCR用来以后的连接用的,PCR条带不亮,以后很多后续工作无法完成的,具体PCR产物不适合做PCR模板的原因可能是因为PCR酶的问题,我也没深究,回头找一个很牛的师姐问问,帮你解释下
14楼2012-12-04 21:44:03
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swach

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我是新手,有一点不明白。你用的是胶回收试剂盒吗,那第一步PCR用的是什么引物,是16S通用引物吗?胶回收纯化得到的基因组和初提的基因组是不是总量会不同呢?请教
15楼2014-07-07 17:23:53
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