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小心点

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】质粒提取的杂质去除问题

最近买过来的普通3.0k质粒,在大肠杆菌Top10里存着,提取的时候,菌体用TE洗过了,用酚氯仿也抽提了两次,在界面明显已经没有蛋白杂质了,但是最后乙醇沉淀的时候,还是出现了大量的白色絮状杂质,这个到底是怎么回事啊?
怎么能把杂质去除干净呢?
大侠们帮忙啊
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小心点

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by aga0110125 at 2010-09-30 11:29:56:
看清楚再说话啊,加了乙醇还取上清 ,找死啊!
蛋白质要么酚氯仿多抽提几次,混匀的时候振荡时间长一点
要么就用硅胶柱提

抽第二遍都看不到杂蛋白了啊,很是郁闷。酚氯仿处理时间长了,质粒不就都断裂了么。
6楼2010-09-30 21:48:32
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小-丑鱼

捐助贵宾 (正式写手)

对我而言可爱的她

silicare:应该是 去上清吧 2010-10-08 12:12:28
白色絮状沉淀是正常现象,然后离心,取上清
放不下的,除了手中的金箍棒,还有你的手。
3楼2010-09-30 09:56:59
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aga0110125

银虫 (小有名气)


scelab(金币+1):谢谢交流!:tiger06: 2010-10-01 23:46:35
看清楚再说话啊,加了乙醇还取上清 ,找死啊!
蛋白质要么酚氯仿多抽提几次,混匀的时候振荡时间长一点
要么就用硅胶柱提
4楼2010-09-30 11:29:56
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小心点

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 602059625 at 2010-09-30 09:50:07:
用试剂盒

100ml菌液大量提质粒,试剂盒明显不给力啊
5楼2010-09-30 21:46:43
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