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小虫仔

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】考马斯亮蓝法测定蛋白质的标准曲线 已有3人参与

各位虫友,帮忙下下,提供下考马斯亮蓝法测定蛋白质的标准曲线,谢啦!
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田俊杰16

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by panel at 2010-09-20 22:21:03
为什么不自己做呢,很简单的呀

我想请教一下,我做的标曲怎么一个9都没有啊,我是按照下面做的啊
试剂:标准蛋白质溶液(㎎/ml),0.1mg/ml牛血清白蛋白,称取25mg的牛血清蛋白,用水溶解并定容到100ml,提取上述溶液40ml,用蒸馏水稀释到100ml。
考马斯亮蓝G-250溶液:称取100mg考马斯亮蓝G-250,溶于50ml90%乙醇中,加入100ml85%(W/V)的磷酸,再用蒸馏水定容到1L,贮存于棕色瓶中。常温下可保存一个月。
仪器:11支5ml试管(做标曲用)
步骤:(标准曲线的绘制)
编号        空白        1        2        3        4        5        6
标准蛋白(µl)        0        10        20        30        40        50       
PBS(µl)        300        290        280        270        260        250       
考马斯亮蓝(ml)        3        3        3        3        3        3        3
考马斯亮蓝我也过滤过了,就是标曲不行啊,麻烦看看是哪里不对啊
8楼2013-04-20 09:17:18
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panel

金虫 (小有名气)

为什么不自己做呢,很简单的呀
宁缺毋滥
2楼2010-09-20 22:21:03
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)

小虫仔(金币+1):很满意 2010-09-21 14:32:27
用标准液做成梯度液,然后找个峰值,自己多测一会吸收峰,用表格划条线,找到方程式,带入你待测样,OK,这一切就这么轻松并且愉快的完成了
风中摇曳的颤枝,何处是归根?
4楼2010-09-21 07:40:22
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

小虫仔(金币+1):很满意 2010-09-21 14:33:39
这个要自己测吧!不同条件下测出来的是不一样的。
一个人可以不成功,但不可以不成长!
5楼2010-09-21 08:42:24
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