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cuipingzh

金虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】HPLC峰面积变了

大家好！情况如下：刚买了一个C8柱，进以前的对照峰面积降了40%，而用旧柱子进样（和新柱子型号一样），峰面积和以前一样。具体如下：流动相（乙腈：水=30:70，水相中含有0.1%的酸），配对照的溶剂为甲醇（含有0.1%的酸），此对照进样时新旧柱子的峰面积差40%（新柱子的峰面积小）。当用流动性配对照时，两者峰面积一样。怎么回事呢？因为我的样品只溶于酸性甲醇，为什么新柱子的峰面积会降这么多呢，而且没有杂质?

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请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。已经有5人回复

1楼2010-09-19 11:01:39

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朔望月

新虫 (初入文坛)

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cuipingzh(金币+1): 2010-10-05 08:11:10

总结一下你问的内容：
1.流动相（乙腈：水=30:70，水相中含有0.1%的酸），配对照的溶剂为甲醇（含有0.1%的酸），此对照进样时新旧柱子的峰面积差40%（新柱子的峰面积小）。当用流动性配对照时，两者峰面积一样。怎么回事呢？因为我的样品只溶于酸性甲醇，为什么新柱子的峰面积会降这么多呢，而且没有杂质?
2.柱效差不多，柱子是Agilent的。关键是用流动相配时，两者峰面积一样
3.同一个样品，连续进样，峰面积越来越大。
窃以为，你这里有两个问题：1.同批号的两根柱子，样品峰面积差异大的原因？2.同样品峰面积增大的原因？
想了解一下更详细的内容：溶剂：酸性甲醇，用什么什么调节pH，pH多少？工作站是哪个，流动相是什么？新柱子做出的对照溶液和供试品溶液都平行低吗？
第2个问题估计的样品甲醇挥发，浓度变大或者pH影响柱子造成的，只要RSD小于0.2%应该没问题。
第一个问题的答案，我也好想知道啊！哪位高手指点请迷津吧。