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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物医学基础 » 【求助】HO33342染色
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aegeansyang

银虫 (正式写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
americanyk(金币+1):谢谢回帖交流 2010-09-16 09:54:47
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Originally posted by mzlfengye at 2010-09-16 10:05:24:

在荧光显微镜下，用普通倒置就能看到有细胞，我的细胞是贴壁细胞，按理来说在材料上的形状应该和平面培养的形状差不多，菱形。但是怎么都是圆的啊？

你指正常光下观察到细胞呈圆形？ 如果是，你这个细胞培养了多长时间？或者就表明该材料上细胞不易贴附。
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11楼2010-09-16 11:24:51
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aegeansyang

银虫 (正式写手)
★
americanyk(金币+1):谢谢回帖交流 2010-09-16 09:54:55
引用回帖:
Originally posted by mzlfengye at 2010-09-16 10:33:11:


那也有可能是我的染色方法有问题。您能不能告诉我一个比较成熟的染色方法啊！谢谢！

可以稍加大浓度，延长时间等试试看。。。染核是最容易的了，没有什么特别的地方，应该不要穿膜处理吧。
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12楼2010-09-16 11:26:03
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mzlfengye

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by aegeansyang at 2010-09-16 11:24:51:



你指正常光下观察到细胞呈圆形？ 如果是，你这个细胞培养了多长时间？或者就表明该材料上细胞不易贴附。

培养了2d多吧，在正常光下看到细胞是圆的。
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13楼2010-09-16 11:29:26
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mzlfengye

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by aegeansyang at 2010-09-16 11:26:03:



可以稍加大浓度，延长时间等试试看。。。染核是最容易的了，没有什么特别的地方，应该不要穿膜处理吧。

用的两个浓度，10ug/ml和100ug/ml的染液泡的，至于染色时间，10ug/ml的有30多min，100ug/ml的有15min。
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14楼2010-09-16 11:31:32
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aegeansyang

银虫 (正式写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还真不知道出什么问题了。。。呵呵
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15楼2010-09-16 12:22:34
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mzlfengye

银虫 (小有名气)
我刚才又重新做了一下，还是和昨天一样。觉得纳闷，就打电话给仪器的客服，工程师告诉我，我们选的光源不是紫外光，选错了。按他的指导，选成紫外光后，能看到蓝色的圆细胞，由于材料在染色后没有漂洗，所以材料背景也是淡蓝色，但是很明显能看出来有细胞，且呈淡蓝色，圆形。应该是活细胞了吧？心理顿时踏实多了。谢谢各位啦！
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16楼2010-09-16 16:41:32
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aegeansyang

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by mzlfengye at 2010-09-16 16:41:32:
我刚才又重新做了一下，还是和昨天一样。觉得纳闷，就打电话给仪器的客服，工程师告诉我，我们选的光源不是紫外光，选错了。按他的指导，选成紫外光后，能看到蓝色的圆细胞，由于材料在染色后没有漂洗，所以材料背 ...

没敢提出你用错光源的这个可能错误，，，呵呵。。。
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17楼2010-09-16 17:40:15
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mzlfengye

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by aegeansyang at 2010-09-16 17:40:15:



没敢提出你用错光源的这个可能错误，，，呵呵。。。

我用的是别人的仪器，自己不会啊……不过还好，现在都ok了。谢谢啦！
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18楼2010-09-16 19:12:06
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