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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】HPLC梯度洗脱如何改进让峰分离更好
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lyn_zoe

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC梯度洗脱如何改进让峰分离更好 已有17人参与


上面是我做的高效液相色谱分析样品的结果
梯度洗脱程序：流动相甲醇和水
0-5min 68%-70%甲醇
5-15min 70%-75%甲醇
15-40min 75%甲醇
41-45min 68%甲醇
流量1ml/min 254nm 30摄氏度柱温 进样量10微升
分析仪器是安捷伦1100 柱子ZORBAX Extend-C18液相色谱柱
样品里面成分较多，很难实现分离，希望对HPLC有经验的大侠给与意见或建议，小女子万分感谢！
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1楼 2010-09-15 16:53:38
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jiaoyuanming

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
xiaodu2007693:编辑内容 2010-09-15 23:47
溶剂是选甲醇，水；或者乙腈水：梯度变化选择1，或者其他，走几样品就会有感觉的，柱温可以加十度试一试。等等，考察条件，你先从0-100%走一针看一下。

[ Last edited by xiaodu2007693 on 2010-9-15 at 23:47 ]
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5楼2010-09-15 21:16:54
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清凉之水

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢回帖！ 2010-09-15 23:58:01
梯度的跨度有点小，刚开始时，甲醇的比例调整为50％试试
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2楼2010-09-15 20:24:10
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lyn_zoe

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 清凉之水 at 2010-09-15 20:24:10:
梯度的跨度有点小，刚开始时，甲醇的比例调整为50％试试

谢谢，相应的时间都要延长了吧？
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3楼2010-09-15 21:08:37
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jiaoyuanming

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
从梯度上考虑，柱子的温度，溶剂的选择。
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4楼2010-09-15 21:13:20
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