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大蓝猫5558

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】液相色谱操作中一个实际问题 已有17人参与

在实际使用液相色谱时,打一个样,大约需跑柱15min,后面10min没有峰了,如果我还打类似的样品,还用同样的流动相,可不可以直接打,也就是不洗柱子了。我现在的操作流程是这样的:
(1)准备:用甲醇洗泵头——洗柱子,花去20min,
(2)打样1前:用流动相洗泵头——洗柱子,花去20min,
(3)打样1中:打进样品——色谱分析,花去20min (15min后就没峰了),
(4)打样1后:换上甲醇洗泵头——洗柱子,花去20min,
(5)准备打样2:用流动相洗泵头——洗柱子,花去20min,
(6)打样2中:打进样品——色谱分析,花去20min ,
(7)打样2后:换上甲醇洗泵头——洗柱子,花去20min,
(8)关机。
也就是说,我要打完2个样,至少要花掉140min,所以请色谱高手指点一下,步骤(4)和(5)是否多余,或者你们有什么好的建议,望指点!
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yufu0522

木虫 (正式写手)

大蓝猫5558(金币+10):非常感谢啊,我是个液相色谱新手,不太熟悉操作流程,您的指点对我非常有用啊!! 2010-09-15 22:48:52
happy169(ACI+1):非常感谢您的热心指导 2010-09-17 08:05:28
(1)准备:用甲醇洗泵头——洗柱子,花去20min,
这步可以省去,平衡整个系统可以用流动相

(2)打样1前:用流动相洗泵头——洗柱子,花去20min,
20min  要看柱子的大小,长度,整个系统是否平衡


(3)打样1中:打进样品——色谱分析,花去20min (15min后就没峰了),
  走样时间一般为主峰的两倍时间

(4)打样1后:换上甲醇洗泵头——洗柱子,花去20min,
可以省去这步

(5)准备打样2:用流动相洗泵头——洗柱子,花去20min,
没换流动相,这步可省

(6)打样2中:打进样品——色谱分析,花去20min ,
两倍主峰时间

(7)打样2后:换上甲醇洗泵头——洗柱子,花去20min,
流动相是否为缓冲盐,若是,先用20倍柱体积的10%甲醇水,在用甲醇冲洗20倍柱体积或40min

(8)关机。
可以在冲洗柱子时,关掉检测器(灯有一定的寿命时间)
15楼2010-09-15 22:14:52
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13073456851

金虫 (正式写手)

没听说过像你这么自找麻烦的~
如果真的要到每进一针就要冲柱子几十分钟的话,那还不如对样品进行预处理了
子非鱼,焉知鱼之乐?
2楼2010-09-14 21:00:40
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13073456851

金虫 (正式写手)

大蓝猫5558(金币+1):谢谢,受教了! 2010-09-15 18:23:50
你完全可以先跑一针1个小时看看,如果没有峰出来,那完全就可以连续进样了,也不知道是谁告诉你要你那么做的,真是觉得......
子非鱼,焉知鱼之乐?
3楼2010-09-14 21:02:32
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jinger8017

银虫 (小有名气)

大蓝猫5558(金币+1):谢谢,受教了! 2010-09-15 18:23:58
这样做太自找麻烦了,一针走完直接进下一针就行了。如果样品不一样可以洗一下进样阀在进下针。
4楼2010-09-14 22:17:08
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