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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】麻烦各位虫友指点一下，问题很简单，我却不懂啊！！！
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)
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动物体内好转接？ 一般都用大肠杆菌...动物体的还真没接触过，动物体不止动物体，真核的貌似都还停在理论阶段，呵呵，祝楼主好运
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风中摇曳的颤枝，何处是归根？
11楼2010-09-18 23:17:51
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lovetanyang

银虫 (小有名气)
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引用回帖:
Originally posted by tingyuhe at 2010-09-14 14:45:40:
PCR扩增出目的基因，连上GFP。。。至于到动物体内，不是很清楚。。

我觉得楼主可能面临两个方面的问题：1、药物对目的基因自身的影响，如是否影响基因拷贝数等。可以用RT-PCR的方法来解决。2、研究药物对目的基因所表达的蛋白的影响。这个可以通过目的蛋白偶联GFP在荧光显微镜下观察得到。至于如何将目的蛋白与GFP融合，则可以通过构建目的蛋白和GFP融合表达的质粒，通过动物细胞转染的方法得到。转染的方法很多，试剂盒法，电转法都可以，看你有什么设备了。
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12楼2010-09-18 23:40:13
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lovetanyang

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 魑魅-魍魉 at 2010-09-18 23:17:51:
动物体内好转接？ 一般都用大肠杆菌...动物体的还真没接触过，动物体不止动物体，真核的貌似都还停在理论阶段，呵呵，祝楼主好运

基因枪可以让质粒直接在宿主动物体内产生蛋白，只是国内的这个设备不多，到还是有的。
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13楼2010-09-18 23:41:46
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by lovetanyang at 2010-09-18 23:41:46:

基因枪可以让质粒直接在宿主动物体内产生蛋白，只是国内的这个设备不多，到还是有的。

基因枪貌似厦大还是云南哪里有个做的，金枪，那个东西不好把握的，力度、准头都不好说，呵呵，依然祝你好运
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风中摇曳的颤枝，何处是归根？
14楼2010-09-19 08:08:26
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bunny0512

银虫 (小有名气)
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silicare(金币+1):的确如此 2010-09-19 11:51:48
到动物体内的话,可以做转基因动物,时间大约要半年,还不一定能出来.
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在哪里~在哪里见过你~
15楼2010-09-19 11:27:55
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feng__

金虫 (著名写手)

雾~蝶
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转基因动物做起来太麻烦了，但是貌似也只有这种方法
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会不会偶尔也会想起我....
16楼2010-09-19 11:44:27
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xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋
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同意九楼
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第三军团
17楼2010-09-20 17:02:29
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