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hcming

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】关于MTT检测淋巴细胞活性的若干问题，请教各位大侠~~ 已有8人参与

最近在做MTT的实验，有些问题想请教各位，先谢谢大家了~~~
另外不知道我的帖子有没有重复，但这是我自己做的实验，有自己碰到的问题，望大家帮帮小菜。。

1、染毒然后要离心去培养液，但我发现2000转并不能是细胞完全沉到板底，有些孔还是悬着？另外，大家是用什么方法除去培养液的？我发现如果直接倒或者用移液枪吸的话，都会有误差。

2、最后用酶标仪检测的波长是490nm还是570nm？参考波长是什么意思？

3、调零孔和对照孔的作用是什么？最后的结果怎么表示？

4、一般检测出来的OD值在什么范围比较可信？如果低了，是不是表示每孔加的细胞数太少了，一般一个空要多少个左右？

5、还有我的反应体积是100μL（培养基40+细胞悬液50+毒素10），有影响么？有些人用的是200μL。

6、MTT配置是，不用过滤关系大不大？

[ Last edited by hcming on 2010-9-13 at 18:31 ]

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