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guoguo1988820

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于中药血清药物化学的一些问题,急!

最近在做中药的血清药物化学研究,其中中药的主要成分是黄酮类,

[ Last edited by guoguo1988820 on 2010-9-27 at 11:53 ]
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babituo

金虫 (初入文坛)

guoguo1988820(金币+1): 2010-09-12 11:52:20
取多少血清处理(200ul,300ul,400ul?......)吹干定容用多少甲醇(200ul,100ul,60ul?......),要不用空白血浆再做下方法学,看用这种方法处理能否检测出目标物?我们检测物质用蒸发光放大八倍检测,如用液质都检测不出来,真很让人头疼。液质能否检测出目标物标准品?
水的有风度
4楼2010-09-12 09:52:04
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babituo

金虫 (初入文坛)

guoguo1988820(金币+1): 2010-09-11 22:53:40
怎样取的血(剪尾,眼眶?.......),血清怎样处理的(加醇,加碱,过C18小柱?......),取血点怎样定的(1h内几个点,8h内几个点。24h内几个点?......),是否取同一只大鼠做的空白血清?血清取出后是否马上处理?检测器是否灵敏,最低检测限能否达到ng级?实在不行就做下液质吧,几百ng,几千ng都能检出来。
水的有风度
2楼2010-09-11 22:21:00
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guoguo1988820

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by babituo at 2010-09-11 22:21:00:
怎样取的血(剪尾,眼眶?.......),血清怎样处理的(加醇,加碱,过C18小柱?......),取血点怎样定的(1h内几个点,8h内几个点。24h内几个点?......),是否取同一只大鼠做的空白血清?血清取出后是否马上处 ...

每个时间点设置多只大鼠,利用股动脉取血的
血清的处理是先加酸,然后利用甲醇沉淀蛋白,也试过乙酸乙酯萃取,过固相萃取小柱等方法,都没检测出来
空白也是取多只大鼠混匀后做的
血清取出后是立马处理,用空气吹干后再溶解进样的
检测器目前用过高效液相及液质联用了,利用液质连用的MRM全扫描后,也几乎检测不到,不知道是不是这些原型成分不吸收入血,也不应该啊,中药一般都是口服的?
3楼2010-09-11 23:02:07
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guoguo1988820

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by babituo at 2010-09-12 09:52:04:
取多少血清处理(200ul,300ul,400ul?......)吹干定容用多少甲醇(200ul,100ul,60ul?......),要不用空白血浆再做下方法学,看用这种方法处理能否检测出目标物?我们检测物质用蒸发光放大八倍检测,如用液 ...

血清取的是1ml,最后用甲醇定容到500ul,这种样品处理方法以前做静脉注射的时候就用过,方法学也验证国,基本上是没问题的,所要成分都能检测出来。现在就是很头疼了,在把生药量加大的话,动物也受不了,而且提取物的水溶性也不算是很好。
5楼2010-09-12 11:52:07
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