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hppxxb

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助】过柱子洗脱问题

想过硅胶柱子，物质的极性比较大，用氯仿-甲醇-水 8:2:0.2的比例洗脱，上样之前可以用这个比例淋洗柱子吗

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1楼2010-09-10 10:15:46

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h_chen

铁杆木虫 (著名写手)

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hppxxb(金币+1):谢谢参与

按教材来说，Rf值为0.2-0.3即可上柱洗脱进行分离。你的样品如果是氯仿甲醇80:20:2的比例来洗脱，你的样品的极性很大，是有糖吧，三相系统面临的是回收溶剂比较麻烦的问题。
如果是干法装柱，最好是先用洗脱剂过一下柱子，因为洗脱剂开始接触硅胶的时候放热，如果样品对热敏感，可能会破坏；再就是可以使硅胶柱更均匀。
如果极性很大的样品用反相柱可以试试，比如RP18