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二氧化钛

金虫 (小有名气)

[交流] 【讨论】BCA法侧蛋白质和考马斯蓝法是一种方法么,有什么区别 已有6人参与

BCA法侧蛋白质和考马斯蓝法测蛋白质是一种方法么,有什么区别
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dylee

金虫 (著名写手)

Immunoassay-Man


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引用回帖:
Originally posted by 二氧化钛 at 2010-09-06 22:02:35:
BCA法侧蛋白质和考马斯蓝法测蛋白质是一种方法么,有什么区别

是有区别的,现在目前的BCA法文献中也用的较多,如Pierce(现被收购在Thermo旗下的)的BCA Kit 可以使用多次,灵敏度也不错。它有两种规格的。http://www.thermo.com.cn/Product4025.html ,可以找其各地经销商http://www.thermo.com.cn/article.aspx?id=3690 订的。前一段在查这个就顺便附上,省下你的时间。
    个人做研究喜欢追根溯源,知其来龙去脉,对于诸法于一目的者当分门别类,知其所长所短,当然经典文献是必要的。我觉得对于测蛋白的基本方法都应有所涉猎的。以下是我花了银子文献传递的两篇文献,都很全面。两篇区别不太大。Stoscheck, C. (1990). "Quantitation of Protein." Methods in Enzymology 182: 50-69
Noble, J. E. and M. J. A. Bailey (2009). Chapter 8 Quantitation of Protein. Methods in Enzymology. R. B. Richard and P. D. Murray, Academic Press. Volume 463: 73-95.

米人链接:http://d.namipan.com/d/633ea510a ... 11622f07e9bab000f00
http://d.namipan.com/d/25acc5d44 ... 297daa53bcd66d70400


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Contents
1. Introduction 74
2. General Instructions for Reagent Preparation 75
3. Ultraviolet Absorption Spectroscopy 80
3.1. Ultraviolet absorbance at 280 nm (Range: 20–3000 mg) 80
3.2. Method 81
3.3. Comments 81
3.4. Ultraviolet absorbance at 205 nm (Range: 1–100 mg) 82
3.5. Calculation of the extinction coefficient 82
4. Dye-Based Protein Assays 83
4.1. Protein concentration standards 83
5. Coomassie Blue (Bradford) Protein Assay (Range: 1–50 mg) 85
5.1. Reagents 85
5.2. Procedure 85
5.3. Comments 86
6. Lowry (Alkaline Copper Reduction Assays) (Range: 5–100 mg) 86
6.1. Reagents 87
6.2. Procedure 87
6.3. Comments 88
7. Bicinchoninic Acid (BCA) (Range: 0.2–50 mg) 88
7.1. Reagents 88
7.2. Procedure 89
7.3. Comments 89
8. Amine Derivatization (Range: 0.05–25 mg) 89
8.1. Reagents 90
8.2. Procedure 90
8.3. Comments 90
9. Detergent-Based Fluorescent Detection (Range: 0.02–2 mg) 91
呃我没说我是好人吧
7楼2010-09-12 11:04:02
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dj04164

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不是同一种方法,使用的试剂都不一样,原理自然也不同。详情可以查询相关的kit说明书。thermo, 生工等试剂公司都有卖的,自己查查看。

[ Last edited by dj04164 on 2010-9-6 at 23:29 ]
2楼2010-09-06 23:28:11
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猫猫团

银虫 (初入文坛)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dj04164 at 2010-09-06 23:28:11:
不是同一种方法,使用的试剂都不一样,原理自然也不同。详情可以查询相关的kit说明书。thermo, 生工等试剂公司都有卖的,自己查查看。

[ Last edited by dj04164 on 2010-9-6 at 23:29 ]

当然不一样啦,试剂不一样。
考马斯亮蓝与蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。
而BCA试剂是由试剂A、B、C、按25:24:1配制而成的,在570nm下测吸光度。
3楼2010-09-07 15:27:30
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dj04164

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 猫猫团 at 2010-09-07 15:27:30:



当然不一样啦,试剂不一样。
考马斯亮蓝与蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。
而BCA试剂是由试剂A、B、C、按25:24:1配制而成的,在570nm下测吸光度。

呵呵,这个小妹妹呀,ABC是通用于各种试剂盒中试剂的代号。
帮楼主找了份说明,自己看看吧
http://uchome2.hbtv.com.cn/space ... do=blog&id=8900
4楼2010-09-07 15:50:27
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