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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么100+bp的PCR产物回收后测浓度很低？
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西-南

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】为什么100+bp的PCR产物回收后测浓度很低？ 已有4人参与

PCR产物是170+和110+两个片段，用200ul的PCR产物回收和500ul的PCR产物回收所得浓度一样，170+只有80ng/ul,110+的只有40ng/ul。因为对产物浓度要求较高，这个浓度根本无法满足后续实验要求，请问是因为片段太小分光光度计测量问题，还是回收试剂盒问题（试剂盒用的天根的凝胶回收试剂盒）？需要怎么改进？
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1楼 2010-09-06 10:50:37
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蔷薇泡泡22

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小于300bp的要加异丙醇提高回收率。我的202bp，用250ul体系回收的浓度达到100以上，建议楼主加异丙醇试一下，祝你成功！
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5楼2015-12-09 15:54:44
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西-南

新虫 (初入文坛)
如果是试剂盒有问题，请大家推荐个好用的小片段PCR产物回收试剂盒
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2楼2010-09-06 11:04:15
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capsaicine

铁杆木虫 (正式写手)
多PCR一些，小片段是容易丢失的，提高扩增的产量，回收的量就可以保证了！
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3楼2010-09-17 18:44:37
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aaron2012

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以适当的增加一些循环数   或者像楼上说的P几次再回收
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生物，特别是分子生物，贵在坚持！
4楼2010-09-17 22:55:18
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