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zhshch2009

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带?

请问各位做过蛋白纯化的同仁:我纯化的蛋白为何洗脱出来的是三条带?应该是100KD左右的一条才对,这是什么原因?难道是被打断了?另外这三条带都比100KD小~而加起来的总和又不100KD大

[ Last edited by zhshch2009 on 2010-9-2 at 10:21 ]
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zhshch2009

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yitonghui at 2010-09-02 15:35:40:
应该还需要进一步纯化,下一步采用分子筛的话,把柱子装好点,摸索一下上样量和流速,下一步离子交换的话,摸索一下PH,1MNaCl梯度洗脱

分子筛的柱子很贵吧~~~~
16楼2010-09-02 19:27:23
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zhshch2009

铁虫 (小有名气)

另外这三条带都比100KD小~
2楼2010-09-02 10:15:28
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yaojc

木虫 (正式写手)

zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 10:29:35
是不是分解了,你是电泳检测的吗?

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19 ]
专注、专心、专业
3楼2010-09-02 10:17:28
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zhshch2009

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-09-02 10:17:28:
是不是分解了,你是电泳检测的吗?

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19 ]

对的,跑的SDS-PGAE,可是我不明白如果分解了的话为什么三条带加起来大小不等于应有大小呢?
4楼2010-09-02 10:29:23
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