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phoenix211

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】从RNA中扩出含内含子的全基因片段已有9人参与

最近LZ从长枝木霉中扩增一个基因,按CDS设计了引物,提RNA作逆转录,然后再扩增,TA克隆后测序。结果比对后发现扩增出来的片段含有内含子。
非常地不解,这是第二次从RNA中扩增出内含子(以前扩增另外一个基因时也曾从RNA中扩出内含子),希望能有朋友给解答下。
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-09-02 22:56:08
你确定是内含子?在产生RNA时可能有差异剪接,你测的RNA可能多了一个外显子。
3楼2010-09-02 08:47:41
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wefghgjg

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
ding
孤独
2楼2010-09-02 01:22:24
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有可能存在基因组DNA污染.
4楼2010-09-02 10:13:43
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天


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提RNA作逆转录,然后再扩增
应该不会有内含子了的啊
海到尽头天做岸,山登绝顶我为峰。
5楼2010-09-02 10:38:21
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