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wjger

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[交流] 【求助/交流】PEGFP-N1与目的条带连不上已有5人参与

载体：PEGFP-N1

目的基因大小：1500bp左右

酶切位点：Hind3、BamH1

连接酶：TAKARA T4连接酶

实验过程：PCR产物与19T-simple载体连接，双酶切后，载体带与目的带很好，回收目的带与PEGFP双酶切回收结果连接，一直连不上。

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1楼2010-08-25 11:57:52

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感受态是买的，别人也在用，T载体能切下来，但连不上目的载体，所以判断连接出的问题。比例1:3~1:7，4度过夜。

3楼2010-08-27 11:00:46

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连接酶借过别人正在用的试过，我们新买的也用过。

4楼2010-08-27 11:02:56

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