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coolkerjuuw

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[交流] 【求助】请教：液相检测波长相关问题？已有3人参与

现做一注射液，主要没有紫外吸收，利用末端吸收215nm来测有关物质，用的乙腈：水＝90：10为流动相，乙腈和水也能有很大的吸收峰，换了进口的乙腈也没有改善多少，而且每次进样都不一样，

　　再就是为仿制药，国家标准中含量测定用的是氮测定法，是以前的老标准，按现在审评，此法不可取，要用HPLC法测，波长用末端吸收的波长，可能不合理，该如何进行呢，请各位同仁发表看法。万分感谢。

不知道示差折光检测器的灵敏度如何，是否也可以用来测有关物质。

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1楼 2010-08-22 00:30:50

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coolkerjuuw

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引用回帖:

Originally posted by zhaohua8011 at 2010-08-22 07:57:52:
利用末端吸收215nm，用乙腈（终止波长190nm）是可以的，测氮是不是应该考虑用氨基柱！！！示差折光检测器虽然是通用性强，但灵敏度较差！！！

后来看了10版药典个例里面也有类似的例子，比如阿奇霉素和罗红霉素均用的210nm测含量的，应该是可行的。

我做品种是奥拉西坦，极性非常强，和水差不多吧，用国家标准选用氰基柱做，2min就出峰了，C18柱更是不行。

后来经别人推荐用的安杰尔的HILIC的色谱柱，填料为丙基酰胺键合硅胶，现在用乙腈：水＝85：15为流动相，出峰时间约8分钟，杂质分离也比较好。

但问题又来了，样品每次的测定结果都不一样，4min时不时的就出一个峰，就是说今天4min有峰，明天做4min的峰又没了，有时水也峰，乙腈也有峰，愁人呀。

因为之前从来没用过此类色谱柱，真是无从下手了。