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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC中遇到的问题
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nestzhao

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC中遇到的问题

最近在使用HPLC时，遇到一个情况：
在进样时，头两个样品出现的峰的面积和峰高均与以往的情况类似，属正常；但到了第三个样品时，峰高和峰面积都降低，为以往的1/3~1/4左右，重打前面两个结果正常的样品，此时峰面积和峰高也变成正常时的1/3~1/4；标样的情况也一样，均为正常时的1/3~1/4。所有峰面积和峰高减少的谱图中，目标物质和杂质的出峰时间均与正常情况一致。而且同一个样品的重复性不好。
对管路、泵头等进行过彻底的清洗后，结果一样；重新配制流动相后，结果也一样。
不知道这种情况是什么原因引起的？请各位指教！

ps：
流动相：甲醇：0.1mol/L磷酸二氢钾（磷酸调pH=3）=10:90。（流动相的盐浓度可能比较高，但已经用了很久了，情况一直正常，就只有这次出问题了）
检测样品为植物的提取液，经过离心和微滤膜过滤，进样量为5微升，进样针控制量。
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给力2011
1楼 2010-08-16 16:43:53
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nestzhao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-16 17:01:42:

用滤纸，撕一小块，到处缝隙里试一试，看滤纸湿不湿

好的，去试一下
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给力2011
8楼2010-08-16 17:06:51
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
nestzhao(金币+1): 2010-08-16 16:51:33
看看哪里漏水了，很可能进的样在哪里漏掉了一部分，进样阀，柱子都有可能漏
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-08-16 16:49:31
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nestzhao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-16 16:49:31:
看看哪里漏水了，很可能进的样在哪里漏掉了一部分，进样阀，柱子都有可能漏

柱子应该没漏，检查过多次
我也怀疑过进样阀漏，表面看不出来，但又不知道如何判断
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给力2011
3楼2010-08-16 16:56:04
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
nestzhao(金币+1): 2010-08-16 17:06:13
引用回帖:
Originally posted by nestzhao at 2010-08-16 16:56:04:



柱子应该没漏，检查过多次
我也怀疑过进样阀漏，表面看不出来，但又不知道如何判断

用滤纸，撕一小块，到处缝隙里试一试，看滤纸湿不湿
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
4楼2010-08-16 17:01:42
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