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nestzhao木虫 (小有名气)
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【求助】HPLC中遇到的问题
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最近在使用HPLC时，遇到一个情况： 在进样时，头两个样品出现的峰的面积和峰高均与以往的情况类似，属正常；但到了第三个样品时，峰高和峰面积都降低，为以往的1/3~1/4左右，重打前面两个结果正常的样品，此时峰面积和峰高也变成正常时的1/3~1/4；标样的情况也一样，均为正常时的1/3~1/4。所有峰面积和峰高减少的谱图中，目标物质和杂质的出峰时间均与正常情况一致。而且同一个样品的重复性不好。 对管路、泵头等进行过彻底的清洗后，结果一样；重新配制流动相后，结果也一样。 不知道这种情况是什么原因引起的？请各位指教！ ps： 流动相：甲醇：0.1mol/L磷酸二氢钾（磷酸调pH=3）=10:90。（流动相的盐浓度可能比较高，但已经用了很久了，情况一直正常，就只有这次出问题了） 检测样品为植物的提取液，经过离心和微滤膜过滤，进样量为5微升，进样针控制量。 |
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nestzhao
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