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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】凝胶电泳
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lilirong2009

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】凝胶电泳 已有7人参与

我提的大肠杆菌基因组总DNA 跑0.7%的琼脂糖凝胶电泳后 点样孔中仍有部分亮点，是什么原因啊?  （附上图）
另外，之前我曾用48000bp的DNA做marker跑大肠杆菌基因组总DNA凝胶电泳，从电泳图上看基因组总DNA跑得比marker远，但是我从网上查的大肠杆菌基因组总DNA长度是400多万bp，这是什么原因呢？

[ Last edited by lilirong2009 on 2010-8-13 at 12:58 ]
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1楼 2010-08-13 12:52:36
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lilirong2009

铜虫 (小有名气)
刚才跑了个大肠杆菌和金黄色葡萄球菌基因组DNA，泳道3和4分别是大肠杆菌、金黄色葡萄球菌用DNase I 处理后的电泳图；泳道6和7是肠杆菌基因组DNA；泳道8和9是金黄色葡萄球菌基因组DNA；请问各位高手为什么基因组DNA酶切后电泳图是这样的，酶切不够？大肠杆菌的基因组DNA怎么会跑出这样的条带来？谢谢。
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11楼2010-08-18 21:28:31
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
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看天(金币+1):鼓励 2010-08-13 13:49:44
marker一般是线状
大肠杆菌基因组是环状吧

点样孔里有东西的话，可能是样品不够纯，裹着DNA

[ Last edited by ben1147 on 2010-8-13 at 13:57 ]
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2楼2010-08-13 13:41:39
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励回答 2010-08-13 13:49:54
为什么喜欢把胶倒过来看呢？是用试剂盒提的吧？跟marker比的大小不用管它，这么多提的还不错了，就是有一些些杂质没去干净，多糖啊，蛋白质之类的，再用酚氯仿抽提一次试试。
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金币是赌出来的
3楼2010-08-13 13:43:01
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violet.zhou

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-08-13 18:37:50
用试剂盒提的话，不至于样品不纯导致跑成这样的结果吧。不过可以试下胶回收以后再跑下电泳。建议跑电泳的时候一定要跑marker。
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4楼2010-08-13 14:41:57
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