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三磷酸腺苷铁杆木虫 (职业作家)
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省得天天翻帖子看啦，直接post到这里~~~ 自我介绍一下，我本科4年专业为生物技术，由于是比较基础的学科，所以基本上许多生物学领域的都有接触。现在研转了医学院的药理学，不过对临床医学所知甚少~基础方面由于和生物学想通，所以还是能应付一点 擅长领域： 1、核酸操作：包括纯化、扩增、质粒构建等 2、miRNA、siRNA方面的理论和技术 3、细胞生物学方面的理论和实验，从培养到后续的实验。目前做凋亡，比较熟 4、肿瘤方面：从分子到动物水平理论和技术，临床的不熟…… 5、一点点生物信息学的知识 6、简单数据分析，实验设计等案头工作 7、试剂、耗材选购，因为我跟厂商代理商打交道比较多 8、另外杂七杂八的：了解一些生化、微生物方面的 9、另有诡异的问题也希望能够和大家一起探讨  [ Last edited by 三磷酸腺苷 on 2010-8-10 at 12:17 ] |
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 细胞信号转导 | 核酸生物学实验经验 |
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三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
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amisking(金币+3): 2010-08-10 21:04:27
amisking(金币+3): 2010-08-10 21:04:27
|
1、有些未知基因，因为具有种间保守性，所以可以根据保守区设计引物来扩增。有时候遇到保守性较差的，就可以在尽量靠近引物的5'设计简并碱基。 不同公司表示的方法可能略有差异，你可以先咨询一下比较妥当。 到时候公司合成的引物就会是一些混合引物 当然还有一种简并，是为了照顾表达宿主的密码子偏好性而设计的，本质就是利用引物进行定点突变。 Taq酶是扩增新链的方向是5'-3'，Taq酶是能够容忍靠近5'端引物和模板部分碱基不匹配（换句话说，只要3'的头几个碱基严格匹配就好）。 2、我用PP5设计引物，感觉已经足够了，会判读分析结果就好了。 3、校友，握爪 4、呵呵，这个问题太泛，最好能有具体问题才能对症下药。 |
10楼2010-08-10 17:06:08
2楼2010-08-10 12:38:08
yixuanwin
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