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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

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[交流] 【分享】-三磷酸腺苷-答疑专帖，我也来玩~~ 已有39人参与

省得天天翻帖子看啦，直接post到这里~~~

自我介绍一下，我本科4年专业为生物技术，由于是比较基础的学科，所以基本上许多生物学领域的都有接触。现在研转了医学院的药理学，不过对临床医学所知甚少~基础方面由于和生物学想通，所以还是能应付一点

擅长领域：
1、核酸操作：包括纯化、扩增、质粒构建等
2、miRNA、siRNA方面的理论和技术
3、细胞生物学方面的理论和实验，从培养到后续的实验。目前做凋亡，比较熟
4、肿瘤方面：从分子到动物水平理论和技术，临床的不熟……
5、一点点生物信息学的知识
6、简单数据分析，实验设计等案头工作
7、试剂、耗材选购，因为我跟厂商代理商打交道比较多
8、另外杂七杂八的：了解一些生化、微生物方面的
9、另有诡异的问题也希望能够和大家一起探讨

[ Last edited by 三磷酸腺苷 on 2010-8-10 at 12:17 ]

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1楼 2010-08-10 11:46:44

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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

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★ ★ ★
amisking(金币+3): 2010-08-10 21:04:27

1、有些未知基因，因为具有种间保守性，所以可以根据保守区设计引物来扩增。有时候遇到保守性较差的，就可以在尽量靠近引物的5'设计简并碱基。
不同公司表示的方法可能略有差异，你可以先咨询一下比较妥当。
到时候公司合成的引物就会是一些混合引物

当然还有一种简并，是为了照顾表达宿主的密码子偏好性而设计的，本质就是利用引物进行定点突变。

Taq酶是扩增新链的方向是5'-3'，Taq酶是能够容忍靠近5'端引物和模板部分碱基不匹配（换句话说，只要3'的头几个碱基严格匹配就好）。

2、我用PP5设计引物，感觉已经足够了，会判读分析结果就好了。

3、校友，握爪

4、呵呵，这个问题太泛，最好能有具体问题才能对症下药。