24小时热门版块排行榜    

查看: 3617  |  回复: 20

pxf983621

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-12 06:04:17
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成: 即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链;在Taq酶的最适温度(72℃)下,以引物3’端为合成的起点,以单核苷酸为原料,沿模板以5’→3’方向延伸,合成DNA新链。这样,每一双链的DNA模板,经过一次解链、退火、延伸三个步骤的热循环后就成了两条双链DNA分子。如此反复进行,每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板,每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍,PCR产物得以2n的批数形式迅速扩增,经过25~30个循环后,理论上可使基因扩增109倍以上,实际上一般可达106~107倍。
11楼2010-08-11 20:32:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxfans

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
现在的PCR仪功能很全,设定好程序一切都自动完城了
12楼2010-08-14 17:27:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jolly_2006


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
高温变性,退火,延伸
13楼2010-08-14 20:01:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanzi0501

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也是新手,感觉自己查资料学习要好点,记忆比较深。
14楼2010-08-15 19:08:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuliuchang

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction)
alwayskeepthefaith
15楼2010-12-30 19:22:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tryingtimes

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jndxmmc at 2010-08-11 11:14:01:
你可以看一些关于微生物实验的动画 很形象 我有几个 不知道怎么上穿

真的啊?麻烦能给我发一份吗?trying-4120@sohu.com 这是我的邮箱,谢谢!
没完没了
16楼2010-12-31 00:04:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hello466725

金虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by guoxi_7_7 at 2010-08-09 07:39:58:
谁能讲下PCR的技巧啊?谢谢!!

基本没有什么技巧。全靠参考文献条件,然后自己摸索。加油
多看文献。。。
淡定
17楼2010-12-31 11:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zuixianzi

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
上传一本PCR克隆指南与大家交流
希望能和做植物抗冻以及转录因子的战友多交流
18楼2010-12-31 14:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

181587941

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
高温变性:让模板解链
退火:让引物结合到模板上
延伸:核苷酸结合到引物后面,形成新链

原料一次性加到位,通过温度变化循环来控制复制,循环一次,DNA增倍。两次就四倍。以此类推。

技巧方面嘛,就是引物及模板加多少的问题,对于不同的模板不同浓度的引物,慢慢总结经验吧,引物过多,会形成引物二聚体;太少,效果不好。
19楼2011-01-03 13:17:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胖了一圈

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
16楼: Originally posted by tryingtimes at 2010-12-31 00:04:19
真的啊?麻烦能给我发一份吗?trying-4120@sohu.com 这是我的邮箱,谢谢!...

可以发我一份吗?谢谢先了!229151605@qq.com  非常感谢!
终于申请到账号了……
20楼2014-09-23 22:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 383496411 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +5 苏东坡二世 2026-08-23 5/250 2026-08-27 10:39 by 炜雨
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 17/850 2026-08-27 08:20 by 大萍1987
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +7 晴天加油 2026-08-26 8/400 2026-08-27 07:53 by longfie172
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见