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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】FITC与短肽的连接问题，直接混合
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】FITC与短肽的连接问题，直接混合 已有7人参与

我看到文献中关于FITC与短肽的连接是通过直接混合实现的
是不是FITC可以与短肽中的氨基反应，或者其它原因
反应短肽的氨基与FITC的摩尔比或短肽与FITC的质量比如何设定呢
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1楼 2010-08-03 12:09:33
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
★ ★
看天(金币+2):鼓励 2010-08-07 00:11:00
蜗牛VS蜗牛(金币+7): 2010-09-02 06:57:10
引用回帖:
Originally posted by 蜗牛VS蜗牛 at 2010-08-04 08:42:16:

FITC被葡聚糖修饰后，异硫氰基不消失吧，有多少个这样的基团

FITC的结构很容易查到。要看看葡聚糖怎么修饰FITC，如果共价连接到异硫氰基或者由于空间位阻阻止异硫氰基发挥作用，有效异硫氰基数都会减少，不过做个标记反应还是足够的

缓冲液要碱性的，我都用pH 9.0的CBS。
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在孤獨中享受寂寞，在寂寞中厮殺黎明。我需要的是安靜与潜心。
8楼2010-08-07 00:04:35
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luwowo

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
lstt09nk(金币+3):新虫，鼓励下，欢迎常来~~ 2010-08-03 21:14:46
蜗牛VS蜗牛(金币+3): 2010-08-04 08:41:07
我没做过短肽，但是我曾经做过FITC标记胶原蛋白，的确相互混合就能反应，没什么特异性。一般染料会过量，所以可能事后处理会比较麻烦，一定要把单体透析干净，而且不保证不会有单体残留。
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2楼2010-08-03 12:43:17
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by luwowo at 2010-08-03 12:43:17:
我没做过短肽，但是我曾经做过FITC标记胶原蛋白，的确相互混合就能反应，没什么特异性。一般染料会过量，所以可能事后处理会比较麻烦，一定要把单体透析干净，而且不保证不会有单体残留。

即使透析，也要大体确定可能的结合比例
不然浪费是不科学的
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3楼2010-08-03 20:55:52
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
而且我用的FITC是用高分子物质修饰的，穿不透细胞膜
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4楼2010-08-03 20:56:19
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