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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电泳问题，非常奇怪，急求解决！
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-07-30 11:18:16:
loading buffer可能变质了，pH值不对头，你试试单加loading buffer看看是不是这样

我是很奇怪为什么MARKER 没倒着跑？用的同样的loadingbuffer、同样的缓冲液，目的条带300多bp。为什么不统一的倒着跑？
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
11楼2010-07-30 11:55:12
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liyong1981

金虫 (正式写手)
MARKER?还有加LOADING么？不是直接加的么？
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12楼2010-07-30 11:56:22
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liyong1981

金虫 (正式写手)
或者，你的样品啊，蛋白污染太严重，~
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13楼2010-07-30 11:57:01
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-07-30 11:54:34:
还有，你要留心生活，多美好啊。胶里面加EB的话，EB和你的核酸跑的方向是相反的~ 所以，这就是为什么跑的时间长，一些比较小的片段就看的模糊或者看不见，因为EB都快跑没了，并且片段自身也有扩散~

没用EB，一直用的是gelred，实验室禁止用EB
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
14楼2010-07-30 12:17:33
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-07-30 11:56:22:
MARKER?还有加LOADING么？不是直接加的么？

marker跟loading和gelred混合后点的样，一直以来都是这样点样
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
15楼2010-07-30 12:19:02
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-07-30 11:57:01:
或者，你的样品啊，蛋白污染太严重，~

我们2个人分别用自己的PCR产物，各用各的电泳槽，同一个电泳仪，同时跑的，他的缓冲液是自己配的，之前出现过一次这种情况，这次跑倒了还有可能，我的是买的，从来没出现过这种情况，这次跟他一起跑，就出现了，很诡异
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
16楼2010-07-30 12:22:50
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-07-30 11:57:01:
或者，你的样品啊，蛋白污染太严重，~

也没有，PCR产物没什么蛋白质污染。可能是缓冲液用的时间长了点，要换了。但我跟别人同时跑的，别人的缓冲液确是用了很长时间，但我的才用了没几次啊，并且跟他的不一样，为什么同时出现同样的问题呢？
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
17楼2010-07-30 12:34:56
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hyhyyl

铜虫 (初入文坛)
不大明白你说得倒跑的意思
贴张图看看
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希望成为大家的好朋友
18楼2010-07-30 12:47:14
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
那就加多点loading buffer再跑，可能是PCR体系的盐强度和pH不大对头
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19楼2010-07-30 12:49:14
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by hyhyyl at 2010-07-30 12:47:14:
不大明白你说得倒跑的意思
贴张图看看

图片太大，传不上来，就是目的条带与MARKER跑的方向相反，MARKER从—跑到+，目的条带跑的相反
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
20楼2010-07-30 13:09:41
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