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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-07-30 11:18:16:
loading buffer可能变质了,pH值不对头,你试试单加loading buffer看看是不是这样

我是很奇怪为什么MARKER 没倒着跑?用的同样的loadingbuffer、同样的缓冲液,目的条带300多bp。为什么不统一的倒着跑?
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
11楼2010-07-30 11:55:12
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liyong1981

金虫 (正式写手)


MARKER?还有加LOADING么?不是直接加的么?
12楼2010-07-30 11:56:22
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liyong1981

金虫 (正式写手)


或者,你的样品啊,蛋白污染太严重,~
13楼2010-07-30 11:57:01
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-07-30 11:54:34:
还有,你要留心生活,多美好啊。胶里面加EB的话,EB和你的核酸跑的方向是相反的~ 所以,这就是为什么跑的时间长,一些比较小的片段就看的模糊或者看不见,因为EB都快跑没了,并且片段自身也有扩散~

没用EB,一直用的是gelred,实验室禁止用EB
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
14楼2010-07-30 12:17:33
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-07-30 11:56:22:
MARKER?还有加LOADING么?不是直接加的么?

marker跟loading和gelred混合后点的样,一直以来都是这样点样
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
15楼2010-07-30 12:19:02
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-07-30 11:57:01:
或者,你的样品啊,蛋白污染太严重,~

我们2个人分别用自己的PCR产物,各用各的电泳槽,同一个电泳仪,同时跑的,他的缓冲液是自己配的,之前出现过一次这种情况,这次跑倒了还有可能,我的是买的,从来没出现过这种情况,这次跟他一起跑,就出现了,很诡异
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
16楼2010-07-30 12:22:50
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-07-30 11:57:01:
或者,你的样品啊,蛋白污染太严重,~

也没有,PCR产物没什么蛋白质污染。可能是缓冲液用的时间长了点,要换了。但我跟别人同时跑的,别人的缓冲液确是用了很长时间,但我的才用了没几次啊,并且跟他的不一样,为什么同时出现同样的问题呢?
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
17楼2010-07-30 12:34:56
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hyhyyl

铜虫 (初入文坛)

不大明白你说得倒跑的意思
贴张图看看
希望成为大家的好朋友
18楼2010-07-30 12:47:14
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

那就加多点loading buffer再跑,可能是PCR体系的盐强度和pH不大对头
19楼2010-07-30 12:49:14
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by hyhyyl at 2010-07-30 12:47:14:
不大明白你说得倒跑的意思
贴张图看看

图片太大,传不上来,就是目的条带与MARKER跑的方向相反,MARKER从—跑到+,目的条带跑的相反
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
20楼2010-07-30 13:09:41
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