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noheartman

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教两条片段通过PCR桥接扩增的方法已有9人参与

我有两段DNA,其中一段1.5Kb,另外一段只有60bp,想通过PCR桥接的方法把它们连接起来再进行扩增,想得到1500+60的片段,请教大虾,该怎么做才好。本来计划通过单独的PCR加酶切位点扩增后,胶回收连接起来,但60bp的DNA回收起来有困难,要不有好的回收方法也可以,请赐教。
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noheartman

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-07-28 11:31:03:


这个才是正解!

80多个碱基的引物,我以前没有做过,那Tm值会超高,那是不是只要两步法呢,退火和延伸合并成一步呢?
8楼2010-07-28 15:32:14
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