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weishengsu5

木虫 (正式写手)

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10楼: Originally posted by yesucao at 2011-10-24 16:55:42:
山梨醇的作用不清楚,转化后离心一下,留下大概100微升,用枪头吹打均匀后涂板,每个平板50微升

怎么样,枯草的电转化成功了吗
11楼2012-03-07 10:59:08
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ben1147

木虫 (正式写手)

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2435411楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-10-19 11:38:18:
求教 这里的山梨醇有何作用?转化后需要稀释涂板吗

山梨醇和甘露醇都是提供渗透压的,这个方法的原始文献可以搜一下
High osmolarity improves the electro-transformation efficiency of the gram-positive bacteria Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis
12楼2012-04-19 22:22:03
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chxiuagoing

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2435404楼: Originally posted by yesucao at 2011-10-19 11:04:05
昨天刚做过一次,里面培养基的配置完全一样,就是培养量,培养时间,抗生素啊,温度之类的不同

我按照上面的方法做了五六次啦!!!都没成功啊!!!能告诉我什么条件需要改吗?非常感谢啊啊!!!!!!!!
13楼2012-09-10 08:53:27
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yesucao

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2465374楼: Originally posted by chxiuagoing at 2012-09-10 08:53:27
我按照上面的方法做了五六次啦!!!都没成功啊!!!能告诉我什么条件需要改吗?非常感谢啊啊!!!!!!!!...

要是感受态、电击缓冲液之类的没什么问题,建议你把电击的条件优化一下,做个相应的梯度,还有你用的是什么型号的电击转化仪
14楼2012-09-10 22:08:24
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chxiuagoing

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2465432楼: Originally posted by yesucao at 2012-09-10 22:08:24
要是感受态、电击缓冲液之类的没什么问题,建议你把电击的条件优化一下,做个相应的梯度,还有你用的是什么型号的电击转化仪...

电击转化仪型号不太清楚诶,,,不过最高只能达到3000v的电压。。。
15楼2012-09-21 15:17:09
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chxiuagoing

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2466209楼: Originally posted by chxiuagoing at 2012-09-21 15:17:09
电击转化仪型号不太清楚诶,,,不过最高只能达到3000v的电压。。。...

还有 感受态怎么检测其好坏,电击缓冲液应该是没问题的。。。电击的条件做梯度是指电压吗?还是质粒浓度啊什么的?谢谢不吝赐教,,,我现在还没进去啊。。。感受态做了三批了。。。。
16楼2012-09-21 15:29:46
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chxiuagoing

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2435405楼: Originally posted by yesucao at 2011-10-19 11:05:02
今天培养基上已经长了蛮多的单菌落,实验结果等待进一步的验证

请教枯草电转啊!!!!!!????谢谢谢谢!!!!
17楼2012-09-21 15:37:21
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chxiuagoing

新虫 (初入文坛)

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2435406楼: Originally posted by yesucao at 2011-10-19 11:05:47
电击缓冲液的葡萄糖,我改成甘油了

这个葡萄糖跟甘油的作用是什么啊?请赐教啊!!!???
18楼2012-09-21 15:41:37
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