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rongshuxia

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PDA培养基如何加青链霉素? 已有15人参与

看到有文献:80万单位青霉素钠 终浓度50ug/ml
                  100万单位链霉素 终浓度 100ug/ml

网上有人说链霉素用乙醇溶解,有人说用水溶解。还有人用水溶的需要过滤除菌,用乙醇的不用。

请问如何加向PDA培养基中添加青链霉素?

1、培养基溶化,50-60度时添加?这两种抗生素不能高压前加的吧?
2、直接按200ml 300ml的量加入粉末,还是先配制抗生素母液浓度?关于抗生素母液/原液保存,看网上说常温的,还有常温不超过20度的,还有4度的,还有-20度保存的

请教比较规范的做法,先谢谢了哈。

有金币答谢。
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ffllshz

银虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
大部分抗生素要过滤除菌的,不过氯霉素不需要,因为是乙醇配的
8楼2010-08-15 00:21:43
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
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reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-18 06:09:35
配制浓度参考文献或者工具书说明。

溶剂使用和储藏用温度参照工具书或者产品说明书。

配置成母液,因为一瓶培养基需要的添加量很小,添加固体称量时容易引入误差,且操作麻烦。

在倒平板温度不太高时添加,高温高压时有些物质容易变质。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2010-07-27 03:58:32
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chagn

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-18 06:09:42
先按正常方法配制好培养基,临用前,加热融化培养基,冷至60摄氏度左右加适量链霉素溶液(比如10 000 u/ml,用无菌水配制),此法确信无误。至于乙醇的,有待进一步讨论。
3楼2010-07-27 17:32:34
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louli

铜虫 (小有名气)

★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-18 06:09:47
得看你载体的抗性说明,但是一般我们做的时候都设个梯度,你可以把文献里所说的浓度做一个参照,梯度以它为中心上下浮动。

加抗性得在培养基灭菌之后降到50°左右时加入,一般我们都赔100×的(eg100ML加100ul抗生素)
配的时候在超净台中操作就行啦,得用滤器过滤一下
4楼2010-07-27 19:42:59
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