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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PDA培养基如何加青链霉素？
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rongshuxia

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PDA培养基如何加青链霉素？ 已有15人参与

看到有文献：80万单位青霉素钠 终浓度50ug/ml
                  100万单位链霉素 终浓度 100ug/ml

网上有人说链霉素用乙醇溶解，有人说用水溶解。还有人用水溶的需要过滤除菌，用乙醇的不用。

请问如何加向PDA培养基中添加青链霉素？

1、培养基溶化，50-60度时添加？这两种抗生素不能高压前加的吧？
2、直接按200ml 300ml的量加入粉末，还是先配制抗生素母液浓度？关于抗生素母液/原液保存，看网上说常温的，还有常温不超过20度的，还有4度的，还有-20度保存的

请教比较规范的做法，先谢谢了哈。

有金币答谢。
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1楼 2010-07-26 21:32:57
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chagn

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-18 06:09:42
先按正常方法配制好培养基，临用前，加热融化培养基，冷至60摄氏度左右加适量链霉素溶液（比如10 000 u/ml，用无菌水配制)，此法确信无误。至于乙醇的，有待进一步讨论。
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3楼2010-07-27 17:32:34
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-18 06:09:35
配制浓度参考文献或者工具书说明。

溶剂使用和储藏用温度参照工具书或者产品说明书。

配置成母液，因为一瓶培养基需要的添加量很小，添加固体称量时容易引入误差，且操作麻烦。

在倒平板温度不太高时添加，高温高压时有些物质容易变质。
赞一下(2人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2010-07-27 03:58:32
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louli

铜虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-18 06:09:47
得看你载体的抗性说明，但是一般我们做的时候都设个梯度，你可以把文献里所说的浓度做一个参照，梯度以它为中心上下浮动。

加抗性得在培养基灭菌之后降到50°左右时加入，一般我们都赔100×的（eg100ML加100ul抗生素）
配的时候在超净台中操作就行啦，得用滤器过滤一下
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-07-27 19:42:59
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rosalie161

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
在50-60度时加入，配制成母液，要0.22微米过滤除菌，一般抗生素都不灭菌的，如果用有机溶剂的话，也不用过滤除菌。
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Rosalei.....
5楼2010-07-27 21:04:34
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