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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于细菌 抗性 筛选 质粒基因 进入染色体基因组
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dyszz

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于细菌 抗性 筛选 质粒基因 进入染色体基因组 已有2人参与

各位虫友，
小弟不才，实验遇到诸多问题，现请教大家，还望大家给予指点：

实验细菌  是一种枯草芽孢杆菌，革兰氏阳性菌，
目前已经将其转化为抗性菌株，但仅仅是在质粒上，由于在质粒上的抗性具有不稳定性
目的就是将质粒的那抗性基因转入染色体基因组中，

请附一下具体的实验操作。。

请各位多多帮忙。。不胜感激！！！~~~
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1楼 2010-07-26 15:56:38
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):很热心的斑斑，新小牛人~~ 2010-07-26 17:19:58
用自杀质粒构建基因缺失的原理，可以在染色体上进行抗性标记。
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
2楼2010-07-26 17:05:40
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
或者，应用基因同源重组的原理，也叫线性打靶，构建突变盒，在染色体上插入抗性基因。
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
3楼2010-07-26 17:07:00
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dyszz

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhaohq1209 at 2010-07-26 17:05:40:
用自杀质粒构建基因缺失的原理，可以在染色体上进行抗性标记。

能否给个详细的操作？
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4楼2010-07-26 17:27:21
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dyszz at 2010-07-26 17:27:21:



能否给个详细的操作？

你去查这篇文献看看吧
improvement of pCVD442, a suicide plasmid for gene allele exchange in bacteria
我不知道能否查到全文。如查不到，我可以发给你，呵呵~惭愧~我不会用纳米盘
赞一下(2人) 回复此楼
我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
5楼2010-07-26 20:43:00
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