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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于ELISA实验，用biotin直接包被可以吗？
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lyln

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于ELISA实验，用biotin直接包被可以吗？ 已有4人参与

各位大侠，由于自己对ELISA的了解不多想问一个比较简单的问题。
关于ELISA实验，我用biotin小分子（没有连接蛋白分子）直接包被，然后再与streptavidin结合可以吗？用什么包被液呢？
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最近很彷徨
1楼 2010-07-26 10:27:31
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烟大考研

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+3):谢谢交流 2010-07-26 11:09:30
是的streptavidin预先处理的板子，国外有售，实在不行也可以自己做，不过比较麻烦，一般很少有用Biotin直接包被的，一来是它分子太小，与聚苯乙烯板子进行非特异性结合的时候几乎没有疏水端可以结合，二来，Biotin太容易洗掉了，一般是Biotin连接到某个蛋白上进行包被。R&D公司有Biotin连接的一抗，可以试试
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
4楼2010-07-26 11:02:51
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烟大考研

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
看天(金币+3):谢谢分享 2010-07-26 11:09:16
可以直接用Biotin包被，Biotin：streptavidin=4:1结合，不知道楼主用来做什么，通常选用的都是streptavidin预先覆盖的ELISA板，再进行包被Biotin连接的一抗，这样可以起到放大信号的作用，楼主的目标不明确不好说太多
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
2楼2010-07-26 10:35:04
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lyln

铜虫 (小有名气)
谢谢二楼的回复!
您所说的“streptavidin预先覆盖的ELISA板”意思是streptavidin预先处理的板子吗？
我的实验就是想验证下streptavidin连接的酶放大效果，想先用biotin包被板子，再加入streptavidin连接的酶，然后加入底物检测，可以吗？我所担心得是biotin这样的小分子包被，而不是通常用的抗原抗体那样的大分子包被，没什么问题吧？符合ELISA的包被条件吧？
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最近很彷徨
3楼2010-07-26 10:46:07
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xiguangpeng

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
802195楼: Originally posted by 烟大考研 at 2010-07-26 11:02:51
是的streptavidin预先处理的板子，国外有售，实在不行也可以自己做，不过比较麻烦，一般很少有用Biotin直接包被的，一来是它分子太小，与聚苯乙烯板子进行非特异性结合的时候几乎没有疏水端可以结合，二来，Biotin太 ...

大侠，你好！打扰了。我想请教下，我想把7条12个氨基酸的多肽包被在板子上，做ELISA。做过一次，没有成功，估计是多肽太小了，所以没有包被上。看到你的回复帖子说，可以用生物素标记的方法。我想具体问下，是先用生物素标记我的多肽，然后再用这个标记好的多肽去包被streptavidin预先处理的板子吗？谢谢了
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6楼2012-10-14 20:14:20
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