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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】做western blot时，细胞的要求
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liuxuedong916

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】做western blot时，细胞的要求 已有12人参与

由于提蛋白和western blot都要送出去做，所以有几个问题不清楚
诸如：细胞的个数、细胞在提蛋白前放置时间及放置条件
请给出详细说明
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1楼 2010-07-22 18:36:07
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zal

木虫 (正式写手)
★
liuxuedong916(金币+2):谢谢参与
如果是做western blot用的细胞，当然是新鲜的细胞好了，细胞数尽量多一些，有时一次实验未必有结果，所以多给两瓶比较好！
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欲求其上，必先上上
8楼2010-07-22 23:38:49
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sunyongle1

木虫 (正式写手)
★
liuxuedong916(金币+2):谢谢参与
细胞还是多给点吧，如果是10*7 cells/ml的话，给个10-20ml肯定足矣。如果你说提蛋白也是给别人的话，那就把细胞离心收集下来，包上锡箔纸里，然后放在液氮里，送给他们。细胞放在液氮之前时间越短越好

[ Last edited by sunyongle1 on 2010-7-22 at 20:36 ]
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2楼2010-07-22 20:31:14
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kpyy

金虫 (正式写手)

完美孤独
★
liuxuedong916(金币+2):谢谢参与
这个我也不太清楚，不好意思哦
赞一下(1人) 回复此楼
随着岁月的流逝成长
3楼2010-07-22 20:33:59
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
liuxuedong916(金币+2):谢谢参与
10^5个细胞就差不多能做出中高丰度的蛋白了
如果送出去做，建议提取了蛋白后再送，然后那边给你做定量再跑电泳。冰上运输过去就好了。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-07-22 21:08:50
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