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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

[交流] 【求助/交流】三抗板上的菌落挑至液体培养基中摇菌不长 已有3人参与

最近往大肠杆菌BL21(DE3)中转三个重组质粒,抗性分别为Amp,Kan,Cm,保险起见,选择分别转化,每次转入一个质粒后,做感受态再转第二个质粒。前两次转化都没有问题,转入第三个质粒后,涂布三抗板,长出了单菌落,但是挑到三抗LB中后摇菌摇不出来。怀疑三抗板出了问题,于是换抗生素(其他人用过确定不会出问题的抗生素)重新倒板,依然可以长出单菌落,但是挑到液体里面还是不长。
不知道虫子们遇到过这种情况没有。
现在我选择将液体培养基中抗生素浓度同时减半,不知道能长出来不。画圈ing
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Thank-you,so-blue.
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viskety

新虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是时间不够? 或者挑单克隆时直接把枪头打在摇瓶里?
3楼2010-07-24 22:47:31
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你可以在用两抗试试长不长 分别得两抗组合
2楼2010-07-24 17:06:42
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

引用回帖:
Originally posted by snzydong at 2010-07-24 17:06:42:
你可以在用两抗试试长不长 分别得两抗组合

查出原因了,有两个质粒不兼容。
Thank-you,so-blue.
4楼2010-07-24 23:35:06
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