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cxbaoa金虫 (正式写手)
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[交流]
【求助】紧急求助！关于紫外末端吸收！！ 已有4人参与
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手头两个药物，异环磷酰胺和环孢素A，需要利用紫外测药物浓度。 两年前我就做过异环磷酰胺，没做出来，利用紫外做标准曲线求浓度的。因为异环磷酰胺是在204nm的最大吸收峰，标准曲线能做出来，但是做药物缓释的时候浓度通过标准曲线计算就忽大忽小，得不出缓释的规律。当时网上查了一下有人说200-210是紫外末端吸收，数据是不可靠的，还尝试过高效液相色谱，都没做出确切的数据，实验因此就搁置了。 现在导师又提起来，还加了一个环孢素A，我一查，晕，又是一个紫外吸收很弱的，导师认为我的实验有问题而不是紫外的原因，他甚至拿出他的博士论文，说他以前在190nm测聚丙烯酰胺的浓度都没问题。而且说高效液相也是紫外检测器，原理一样的。绝对是我实验的问题。现在有些头大。 请教大家， 1：做紫外：200左右的吸收峰是不是只要标准曲线能做出来，相关度也还不错，那就是可以测出浓度的？（不要求每个点的精确性，要求得到一个规律性的趋势就行。）确实是我自己试验的问题而与紫外无关？ （另外目前的试验条件只能利用紫外分光光度计。） 2：如何正确理解紫外末端吸收？ 谢谢大家！！ |
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zhbsky
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如何正确理解紫外末端吸收？
cxbaoa(金币+2):感谢 2010-07-25 22:08:14
cxbaoa(金币+2):非常感谢 2010-07-25 22:08:43
cxbaoa(金币+2):非常感谢 2010-07-25 22:08:43
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1.含测问题:当检测波长＜203nm，使用紫外检测器的高效液相法众人皆知是有问题的，你的导师说："在190nm测聚丙烯酰胺的浓度，采用紫外检测器的高效液相法都没问题"，人间传奇！化学药品，试样组成简单，主成分若有紫外吸收，一般采用紫外分光的方法就可搞定，不需“兴师动众”，若有二次干扰吸收，可采用双波长或三波长紫外分光光度法；若是一次干扰吸收（线性背景），可采用一阶导数紫外分光光度法。 2：如何正确理解紫外末端吸收？ 这很简单，峰位于远紫外光区（10-200nm),在近紫外光区（200-400nm）只检测到该峰末端部分，这部分的吸收被称为~，一般由n→σ*跃迁所产生。 [ Last edited by zhbsky on 2010-7-24 at 05:56 ] |
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xkp123
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