24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1438  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

辉辉集团

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】原核表达 已有7人参与

我在做原核表达时,加了组氨酸标签,然后用镍柱纯化,纯化出来的蛋白跑电泳条带很好,纯度很高,但是用PBS透析掉咪唑,再用聚乙二醇浓缩后,然后再去跑电泳,条带变杂了很多,我怀疑是蛋白降解了,请问各位高手 怎么办  谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):谢谢回答 2010-07-20 12:01:51
1 在SDS-PAGE图中,高盐度的样品中微量蛋白不容易看见
2 无论你怎么纯化,都不可能是100%的纯的,IMAC能到95%一般就是不错的。
3 确认你的试剂,例如PBS中有无蛋白污染。
7楼2010-07-20 10:34:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

张力民1598

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-20 08:32:51
会不会是你浓缩之后的蛋白浓度变浓了,导致之前看不到的蛋白可以看到了
2楼2010-07-20 08:31:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寂寞之巅

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
加入蛋白酶抑制剂
好好学习,天天向上
3楼2010-07-20 08:37:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辉辉集团

银虫 (正式写手)

嗯 我也考虑过这个原因

引用回帖:
Originally posted by 张力民1598 at 2010-07-20 08:31:36:
会不会是你浓缩之后的蛋白浓度变浓了,导致之前看不到的蛋白可以看到了

嗯 我也考虑过这个原因   我上样量减少 也就基本上是同等粗细的条带了 还是很明显有杂条带
4楼2010-07-20 08:40:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085602化工求调剂(331分) +8 111@127 2026-03-30 8/400 2026-03-30 21:23 by 研究僧导导
[考研] 359求调剂 +5 王了个楠 2026-03-25 5/250 2026-03-30 19:36 by 源_2020
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +10 1428151015 2026-03-27 10/500 2026-03-30 19:00 by 源_2020
[考研] 342求调剂 +4 加油a李zs 2026-03-26 4/200 2026-03-30 16:39 by 晶体之美
[考研] 284求调剂 +14 junqihahaha 2026-03-26 15/750 2026-03-30 14:12 by 探123
[考研] 085404求调剂,总分309,本科经历较为丰富 +6 来财aa 2026-03-25 6/300 2026-03-30 09:48 by 青海小西牛
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学,化工,生物,生医工等专业优秀学子加入! +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 305求调剂 +8 RuiFairyrui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:22 by fmesaito
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +4 IceGuo 2026-03-26 5/250 2026-03-29 01:25 by griffith2014
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 一志愿郑大085600,310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见