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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】HPLC相关 请问为什么这两个物质怎么都分不开啊
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louishuang

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】HPLC相关 请问为什么这两个物质怎么都分不开啊 已有8人参与

试过各种柱子 BUFFER 也试了不少 可两个物质峰的位置完全重叠 MIX时候一直只有一只峰 而且峰宽比较大  延长梯度也不行 完全没有分开的迹象
[img][/img]

[ Last edited by louishuang on 2010-6-30 at 19:05 ]
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1楼 2010-06-29 21:13:12
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xkp123

木虫 (著名写手)
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铁甲骑兵(金币+1):高手 2010-06-30 09:50:10
用甲醇和磷酸二氢钾，PH值调到5左右，再加点阳离子对试剂进去，例如四丁基铵正离子，十六烷基三甲基铵正离子。
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2楼2010-06-29 21:40:47
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luomuwuhen

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铁甲骑兵(金币+1):嗯，也是高手 2010-06-30 09:50:18
不知道楼主用的啥柱子，如果是c18柱的话，可以用小比例的甲醇来洗脱，极性相近的两种物质分离如果减小流动相强度效果不好的话，还可以调节流动相PH之类的来增大分离度。
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药物合成
3楼2010-06-30 08:49:17
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xkp123

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Originally posted by luomuwuhen at 2010-06-30 08:49:17:
不知道楼主用的啥柱子，如果是c18柱的话，可以用小比例的甲醇来洗脱，极性相近的两种物质分离如果减小流动相强度效果不好的话，还可以调节流动相PH之类的来增大分离度。

调PH值不一定能增大分离度吧，PH调节一般是改善峰型的吧
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4楼2010-06-30 11:42:45
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luomuwuhen

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Originally posted by xkp123 at 2010-06-30 11:42:45:

调PH值不一定能增大分离度吧，PH调节一般是改善峰型的吧

调节PH有时候能调节峰形，有时候也能改变不同成分在柱子上的保留从而改善分离度。比如未调节PH时候A和B保留一样，调节后A或B受PH影响保留改变，自然就分开了。当然这些情况都需要自己调节摸索，比如适当的PH之类
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药物合成
5楼2010-06-30 14:29:30
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xkp123

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Originally posted by luomuwuhen at 2010-06-30 14:29:30:

调节PH有时候能调节峰形，有时候也能改变不同成分在柱子上的保留从而改善分离度。比如未调节PH时候A和B保留一样，调节后A或B受PH影响保留改变，自然就分开了。当然这些情况都需要自己调节摸索，比如适当 ...

这个倒是，不过我看他那两个物质，还是的根据疏水效应大小来分离，因为一个是酸，一个是酮嘛
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6楼2010-06-30 15:21:25
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louishuang

新虫 (初入文坛)
谢谢大家踊跃发言  抱歉之前把结构式画错了 柱子试过XDB-C8 PFP 和CN柱  BUFFER也试过0.1%TFA  10mmolKH2PO4(PH5.0)   0.05%H3PO4 都没什么效果 改变的只有峰形 峰宽一直都比较大
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7楼2010-06-30 19:02:34
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xkp123

木虫 (著名写手)
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Originally posted by louishuang at 2010-06-30 19:02:34:
谢谢大家踊跃发言  抱歉之前把结构式画错了 柱子试过XDB-C8 PFP 和CN柱  BUFFER也试过0.1%TFA  10mmolKH2PO4(PH5.0)   0.05%H3PO4 都没什么效果 改变的只有峰形 峰宽一直都比较大

加阳离子对试剂吧，我跟你说了啊
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8楼2010-06-30 19:20:05
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louishuang

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Originally posted by xkp123 at 2010-06-30 19:20:05:

加阳离子对试剂吧，我跟你说了啊

谢谢了 明天试试 本来今天想试的 没找到试剂
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9楼2010-06-30 19:29:33
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louishuang

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Originally posted by xkp123 at 2010-06-30 19:20:05:

加阳离子对试剂吧，我跟你说了啊

再请问下 加阳离子对 会不会对柱子有伤害 该用什么类型的柱子呢 因为没用过 怕把柱子搞坏了 麻烦你了
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10楼2010-07-03 21:45:34
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