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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电转酵母的问题
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王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】电转酵母的问题 已有3人参与

本人最近在做酵母电转的实验，不知道是电专仪的问题还是怎么了，我将待电转的液体加入电转杯后，通电电转，听到吱吱声响后拔出电转杯，检测通电时间和电压时发现读数为0，接着仍立即加入三梨醇，混匀后将液体转入无菌的EP管，电转杯中还剩余部分液体，我又继续电转看是否通电，结果发现正常通电了。试了几次都是这样，直接电转时不通电，不知道原因在哪里。大家帮我分析一下吧！
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1楼 2010-06-27 12:03:31
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王雨云

金虫 (小有名气)
有气泡会影响呀，那我好像每次加入的时候都有气泡，以前那个仪器维修的师傅说不通电跟制感受态所用的有些试剂有关，建议用三梨醇做感受态，不过我们也都是用的三梨醇，反正我换了一批感受态就能通电了
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5楼2010-07-01 09:26:48
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王雨云

金虫 (小有名气)
自己回答一个，现在知道是感受态的问题，换了感受态就能正常通电了。据说通电状态跟感受态的离子强度有关。
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2楼2010-06-30 18:10:29
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violet.zhou

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3):欢迎交流，欢迎新虫！ 2010-06-30 20:33:25
也许是你加入感受态的时候中间有气泡产生，影响电转化的时候电流的通过。
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3楼2010-06-30 19:49:22
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-01 08:39:36
个人分析应该有两种可能：1、电击杯的液体里有气泡，这种情况最容易发生爆杯的现象；2、需要电转的核酸用TE溶解（一般提取DNA试剂盒的洗脱缓冲液就是pH8.0的TE溶液，tris+EDTA），这样会导致离子浓度过高，从而发生爆杯。建议用水溶解DNA，但要注意的是核酸的水溶液不能保存很长时间，其中的核酸会随着时间而降解。
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
4楼2010-06-30 22:31:05
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