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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求AgeⅠ(BshTⅠ)的保护碱基用什么？
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aqin198701

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求AgeⅠ(BshTⅠ)的保护碱基用什么？ 已有3人参与

引物设计时用到AgeⅠ(BshTⅠ)限制性内切酶，此酶一般用什么保护碱基啊？
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日出东海落西山,愁也一天,喜也一天;遇事不钻牛角尖,人也舒坦,心也舒坦~
1楼 2010-06-25 11:18:29
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-06-25 17:16:38
http://www.fermentas.com/cn/supp ... cleavage-efficiency

两个即可~我现在一般加4~5个，查都不查，因为除非很特殊，否则一般4~5个就够了，而且我刚好拿来调引物的GC比和特异性之类
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5楼2010-06-25 17:06:42
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liyong1981

金虫 (正式写手)
aqin198701(金币+1):谢谢，不过NEB上没有 2010-06-25 16:04:44
上NEB去查，这个酶，妹子，或者你随便加几个碱基，要求不严格的~
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2楼2010-06-25 11:57:49
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aqin198701

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-06-25 11:57:49:
上NEB去查，这个酶，妹子，或者你随便加几个碱基，要求不严格的~

没查见啊！！帮忙差一下可以吗？
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日出东海落西山,愁也一天,喜也一天;遇事不钻牛角尖,人也舒坦,心也舒坦~
3楼2010-06-25 13:17:15
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):感谢交流，不过发现错别字两枚~ 2010-06-25 17:16:22
啊！没有啊。我是用过，但是是在质粒上的，没有加保护碱基~你随便加吧，注意耳机结构，和GC含量，没关系的~~~很多酶，保护碱基并不是要求严格的，CTCAGGCGTTTCTAACCGGTTCTC，我构建好的质粒AgeI的这段是这样的

或者你打NEB北京那边的技术支持，他们应该知道的~
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4楼2010-06-25 16:46:34
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