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aqin198701

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求AgeⅠ(BshTⅠ)的保护碱基用什么? 已有3人参与

引物设计时用到AgeⅠ(BshTⅠ)限制性内切酶,此酶一般用什么保护碱基啊?
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日出东海落西山,愁也一天,喜也一天;遇事不钻牛角尖,人也舒坦,心也舒坦~
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liyong1981

金虫 (正式写手)


aqin198701(金币+1):谢谢,不过NEB上没有 2010-06-25 16:04:44
上NEB去查,这个酶,妹子,或者你随便加几个碱基,要求不严格的~
2楼2010-06-25 11:57:49
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aqin198701

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-06-25 11:57:49:
上NEB去查,这个酶,妹子,或者你随便加几个碱基,要求不严格的~

没查见啊!!帮忙差一下可以吗?
日出东海落西山,愁也一天,喜也一天;遇事不钻牛角尖,人也舒坦,心也舒坦~
3楼2010-06-25 13:17:15
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liyong1981

金虫 (正式写手)



lstt09nk(金币+1):感谢交流,不过发现错别字两枚~ 2010-06-25 17:16:22
啊!没有啊。我是用过,但是是在质粒上的,没有加保护碱基~你随便加吧,注意耳机结构,和GC含量,没关系的~~~很多酶,保护碱基并不是要求严格的,CTCAGGCGTTTCTAACCGGTTCTC,我构建好的质粒AgeI的这段是这样的

或者你打NEB北京那边的技术支持,他们应该知道的~
4楼2010-06-25 16:46:34
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-06-25 17:16:38
http://www.fermentas.com/cn/supp ... cleavage-efficiency

两个即可~我现在一般加4~5个,查都不查,因为除非很特殊,否则一般4~5个就够了,而且我刚好拿来调引物的GC比和特异性之类
5楼2010-06-25 17:06:42
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