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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】测序结果的疑议
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
yinsongna(金币+1):谢谢 2010-06-26 09:13:09
先看下峰图情况是否有重叠峰或者无法辨别的地方。如果说有突变还是比较好理解的，但是有这么多缺失就有点不好理解了。你可以要求他在测一次比较下两次他测的结果如何。记得把编号换一下，免得人家不测就给你发原来的结果了。这种经历我还是有的。
找了别人的原因再找自己的看看。您的第一次结果也是用PFU之后测的么？PCR条件是否有修改等等？
另一方面做实验不能着急，欲速则不达。。。
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52187644
11楼2010-06-24 11:44:13
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠
yinsongna(金币+1):谢谢 2010-06-26 09:14:03
测序一个反应的有效长度是750bp左右，你的是800多了是不是因为测序精度的问题，看看峰图吧！
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麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起，么有鱼丸粗面。。那，我要鱼丸么有鱼丸那，我要粗面…………么有粗面那，我要鱼丸粗面……………………
12楼2010-06-24 13:48:29
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hongrunge

铁杆木虫 (小有名气)
以前我们这边曾经在华大测序，出错很多，从此放弃华大。不知道现在华大如何，也有可能是测序时出错。
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13楼2010-06-25 19:35:57
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wufengjian

木虫 (正式写手)
同意楼上，放弃华大吧，一部血泪史就不说了。改用英骏吧。
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14楼2010-06-25 23:02:42
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天
换家公司去测序下，可能公司把你弄错了
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海到尽头天做岸，山登绝顶我为峰。
15楼2010-06-26 03:30:02
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yinsongna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-06-24 11:44:13:
先看下峰图情况是否有重叠峰或者无法辨别的地方。如果说有突变还是比较好理解的，但是有这么多缺失就有点不好理解了。你可以要求他在测一次比较下两次他测的结果如何。记得把编号换一下，免得人家不测就给你发原来 ...

PCR条件都没变过，就不知道怎么的就缺失那么多，峰图没有套峰
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16楼2010-06-26 09:13:47
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yinsongna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by mgangle at 2010-06-24 13:48:29:
测序一个反应的有效长度是750bp左右，你的是800多了是不是因为测序精度的问题，看看峰图吧！

缺失的地方的确是在他的精确测序范围之内的，我很无奈了
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17楼2010-06-26 09:14:27
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yinsongna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hongrunge at 2010-06-25 19:35:57:
以前我们这边曾经在华大测序，出错很多，从此放弃华大。不知道现在华大如何，也有可能是测序时出错。

真的假的，我一直在华大测的。。。。。
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18楼2010-06-26 09:15:08
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yinsongna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wufengjian at 2010-06-25 23:02:42:
同意楼上，放弃华大吧，一部血泪史就不说了。改用英骏吧。

你别吓我。。。。。。。
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19楼2010-06-26 09:15:34
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
我现在的测序也遇到问题，我们是自己测的，我连T载体挑的两个克隆结果有些地方也是测定不一致，不至于突变的这么容易吧。还有同一个样，我测序的平行结果一个碱基居然有不一致并且峰都很高且特异。请高手指点一下。
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20楼2010-06-26 10:55:37
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