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zemin_fang

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
pcr如果以前做出来了,那表明你的程序没有问题,剩下的就是加入的试剂问题了,酶、模板、引物、dNTP一样一样换,总能找到原因。
再者,操作需细心,不要错加或漏加试剂。
11楼2010-06-23 16:57:52
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zlio.love

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
嗯  实验总难免的
12楼2010-06-23 17:02:31
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peilaming

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
做几个阳性和隐性
对照,换下酶,和引物。原因很多,P不出来或不稳定都很难简单找出哪一方面原因
13楼2010-06-23 17:20:59
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pushizi

木虫 (小有名气)

pushizi

引用回帖:
Originally posted by savid888 at 2010-06-22 22:43:02:
说说你的操作细节吧
否则神也帮不了你

我养了两次菌,第二次是第一次的传代。
这两批菌分别提基因组,相同的方法
PCR用的是相同的条件(退火温度,引物,buffer,dNTP)
一个有条带,一个没有条带。。。。。。。
(这两次的基因组扩另一个基因的结果相同)
没法解释了。。。。。
但愿快乐不停歇,悲伤不再来~
14楼2010-06-23 19:47:48
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bioxiaoqiang

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这种情况是不是引物的问题呢?重新换引物试一试吧。
15楼2010-06-23 19:56:25
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bioxiaoqiang

金虫 (正式写手)

补充呀,你最好在实验设计时做上阴性和阳性对照。
16楼2010-06-23 19:57:09
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newlbs

金虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也遇到过类似的问题,但后来发现是因为没有把matermix混合均匀,造成时好时坏的结果。你一项的排查吧,加个positive control就知道问题是PCR还是DNA了
17楼2010-06-23 20:42:25
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